烟草曲茎病毒复制蛋白基因的原核表达和免疫定位

来源 :微生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：aivinator

【摘要】

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利用PCR方法从烟草曲茎病毒(TbCSV)Y35分离物的病株中获得复制蛋白(Rep)基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上获得重组质粒pGEX-Y35Rep.重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)pLy

【作者】

：

崔晓峰李云琴李桂新周雪平

【机构】

：

浙江大学生物技术研究所

【出处】

：

微生物学报

【发表日期】

：

2004年6期

【关键词】

：

烟草曲茎病毒复制蛋白表达定位 Tobacco curly shoot virus Replication protein Expression Lo

【基金项目】

：

国家自然科学基金，国家自然科学基金

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利用PCR方法从烟草曲茎病毒(TbCSV)Y35分离物的病株中获得复制蛋白(Rep)基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上获得重组质粒pGEX-Y35Rep.重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)pLys S中,IPTG诱导表达后发现部分Rep融合蛋白以可溶性形式表达.利用GST-Sepharose 4B亲和层析柱纯化了Rep的融合蛋白,免疫家兔获得Rep蛋白的抗体.对TbCSV侵染烟草中Rep蛋白的亚细胞分布研究发现,Rep蛋白主要分布于含有细胞核的组份中.利用免疫胶体金技术对感病烟草中Rep

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