【摘 要】
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目的 制备兔抗断裂点集簇区-Abelson鼠白血病病毒癌基因(BCR-ABL) b3a2位点的多克隆抗体并鉴定其特异性.方法 针对BCR-ABL融合蛋白b3a2型的特异性抗原序列,设计并合成纯度高
【机 构】
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南华大学附属郴州医院南华大学转化医学研究所,湖南郴州423000;郴州市第一人民医院高通量分子诊断技术国家地方联合工程实验室,湖南郴州423000;南华大学附属郴州医院南华大学转化医学研究所,湖南郴州
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目的 制备兔抗断裂点集簇区-Abelson鼠白血病病毒癌基因(BCR-ABL) b3a2位点的多克隆抗体并鉴定其特异性.方法 针对BCR-ABL融合蛋白b3a2型的特异性抗原序列,设计并合成纯度高于90％的多肽.一方面通过透孔螺血蓝蛋白(KLH)偶联融合多肽用于免疫新西兰兔,多次加强免疫得到抗血清;另一方面通过仅偶联单独BCR或者ABL肽段对抗血清进行二次纯化,吸附并去除未结合融合表位的抗血清以达到进一步纯化抗体的效果.最终得到的抗血清用于ELISA及Western blot法检测.结果 免疫前兔血清背景均低,免疫后抗血清效价达到1∶32000,满足实验要求.抗原亲和纯化所得抗体纯度及效价高,Western blot法检测表明抗血清能特异性识别BCR-ABL融合基因的b3a2位点,特异性好.结论 制备了针对BCR-ABL基因b3a2位点的特异性兔源多克隆抗体.
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