【摘 要】
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根据GenBank公布的兔出血热病毒(Rabbit haemorrhagic disease virus,RHDV)序列,设计了3条引物,对引物组合进行了筛选,优化PCR体系各反应条件,测定该方法的敏感性与特异性,并
【机 构】
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吉林大学动物医学院,山东省滨州畜牧兽医研究院,山东绿都生物科技有限公司
【基金项目】
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中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金课题
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根据GenBank公布的兔出血热病毒(Rabbit haemorrhagic disease virus,RHDV)序列,设计了3条引物,对引物组合进行了筛选,优化PCR体系各反应条件,测定该方法的敏感性与特异性,并进行临床应用对比试验。结果显示,筛选出的引物组合能够特异性扩增331 bp产物,Mg2+浓度1.0~1.5 mmol/L时扩增效果最好,退火温度在50℃~60℃之间扩增无差异性。该方法可以扩增102拷贝以上的模板,对兔轮状病毒与水泡性口炎病毒检测结果均为阴性;临床应用对比实验显示,与HA检测相比,该方法检出阳性率由66.7%提升至77.8%。本研究建立的RT-PCR诊断方法具有特异、灵敏、快速等特点,能够用于该病的临床检测,为防控该病提供了技术保障。
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