甲基对硫磷水解酶基因的克隆与融合表达

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【摘要】

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利用鸟枪法从甲基对硫磷降解菌DLL-1 Peudomonas putida)中克隆了甲基对硫磷水解酶基因(mpd)片段2.5 kb,并进行了测序.通过软件分析开放阅读框和启动子序列,表明该序列中最可

【作者】

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刘智洪青徐剑宏武俊张晓舟张小华马爱芝朱军李顺

【机构】

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南京农业大学生命科学学院微生物学系

【出处】

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遗传学报

【发表日期】

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2003年11期

【关键词】

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鸟枪法甲基对硫磷水解酶基因基因分析融合表达基因定位 shotgun cloningmethyl parathion hydrolase genegene

【基金项目】

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国家高技术研究发展计划(863计划)，农业部农业科技跨越计划，国家科技攻关项目

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利用鸟枪法从甲基对硫磷降解菌DLL-1 Peudomonas putida)中克隆了甲基对硫磷水解酶基因(mpd)片段2.5 kb,并进行了测序.通过软件分析开放阅读框和启动子序列,表明该序列中最可能为甲基对硫磷水解酶结构基因的阅读框为769～1794区域.软件分析还表明该水解酶前端45个氨基酸为典型的信号肽结构.通过PCR扩增了mpd结构基因,亚克隆到表达载体pET-32a中,构建了完整的融合表达载体pET-MP.转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG的诱导下2～4 h甲基对硫磷水解酶表达可以达到最

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