【摘 要】
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目的 探讨阳离子通道阻断剂钌红对破骨细胞分化的影响及其机制.方法 钌红处理Raw246.7后,50 μg/L核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导6d,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察TRAP+(核≥3)细胞的形成；TRAP试剂盒检测细胞中TRAP酶的活性;实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测破骨细胞特异性标志基因TRAP、组织蛋白酶K(CK)和金属基质蛋白酶-9(MMP
【机 构】
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430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,430030武汉,华中科技
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目的 探讨阳离子通道阻断剂钌红对破骨细胞分化的影响及其机制.方法 钌红处理Raw246.7后,50 μg/L核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导6d,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察TRAP+(核≥3)细胞的形成；TRAP试剂盒检测细胞中TRAP酶的活性;实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测破骨细胞特异性标志基因TRAP、组织蛋白酶K(CK)和金属基质蛋白酶-9(MMP-9) mRNA表达量；RT-qPCR、Western blot分别检测核因子-κB受体活化因子(RANK)在mRNA和蛋白水平上的表达.结果 钌红促进RANKL诱导Raw246.7细胞形成TRAP阳性多核细胞,对照组TRAP吸光度(A)值为0.33±0.04,而钌红组TRAP A值为0.43±0.03;同时也上调了破骨细胞标志性基因TRAP、CK和MMP-9的mRNA表达以及RANK在mRNA和蛋白水平的表达.各指标在两组中的差异有统计学意义(P＜0.05).结论 钌红促进Raw246.7向破骨细胞分化,这一过程与钌红上调RANK表达有关,即与RANK-RANKL轴相关。
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