大肠杆菌腺苷脱氨酶基因的克隆、表达与缺失

来源 :微生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lihaiyun718

【摘要】

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利用途径工程的基本原理,拟在大肠杆菌核苷酸代谢途径中构建腺苷(AR)转化为腺苷三磷酸(ATP)的新途径,故需使细胞内的腺苷脱氨酶基因(add)缺失.通过构建大肠杆菌MC4100 DNA的

【作者】

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钱红亮曾洋叶江张惠展

【机构】

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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室

【出处】

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微生物学报

【发表日期】

：

2002年6期

【关键词】

：

腺苷脱氨酶 ATP 基因缺失途径工程

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利用途径工程的基本原理,拟在大肠杆菌核苷酸代谢途径中构建腺苷(AR)转化为腺苷三磷酸(ATP)的新途径,故需使细胞内的腺苷脱氨酶基因(add)缺失.通过构建大肠杆菌MC4100 DNA的基因文库,筛选得到含腺苷脱氨酶基因的DNA片段.构建表达质粒pBD1和pBD2并实现了表达.在此基础上构建了add基因缺失的带卡那霉素抗性基因的线性5.2kbDNA分子,同时转化JM83、MC4100、BL21(DE3).经遗传稳定性实验和DNA分子杂交鉴定,确认得到了来自JM83的两株add基因缺陷株J1和J2.再对菌株

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