浅色黄姑鱼脑垂体cDNA文库的构建

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以浅色黄姑鱼脑垂体为材料,应用SMART^TM cDNA library construction技术,构建以真核表达载体pcDNA3.1(+)为基础的浅色黄姑鱼cDNA文库。利用含Sfi I B酶切位点的oligo(dT)引物合成cDNA第一链,利用含Sfi I A酶切位点的SMART核苷酸作为cDNA第一链在mRNA5’端延伸出去的模板,采用LDPCR引物合成双链cDNA,双链cDNA用Sfi I酶切和过柱分级分离后,与引入 Sfi I酶切位点的pcDNA3.1(+)-Sfi I载体进行连接,转化大肠
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