【摘 要】
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目的 体外克隆表达THEM6,诱导重组蛋白,制备多克隆抗体,明确在不同组织细胞的表达特征.方法 以外周血单核细胞总RNA反转录得到的cDNA为模板,扩增THEM6基因片段,诱导剂IPTG诱
【机 构】
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首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所,北京市,100015
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目的 体外克隆表达THEM6,诱导重组蛋白,制备多克隆抗体,明确在不同组织细胞的表达特征.方法 以外周血单核细胞总RNA反转录得到的cDNA为模板,扩增THEM6基因片段,诱导剂IPTG诱导THEM6重组蛋白表达,制备多克隆抗体,分析特异性、检测效价.用CCK-8检测试剂盒,分析THEM6重组蛋白对Jurkat细胞增殖的影响;观察该蛋白的组织、细胞系表达分布.结果 成功体外克隆THEM6,获得重组蛋白及抗THEM6的多克隆抗体,ELISA(enzyme-linked immuno sorbent assay)酶联免疫吸附测定检测效价>1 280 000;低浓度THEM6重组蛋白对Jurkat细胞增殖有影响,THEM6蛋白在Jurkat细胞等多种细胞及淋巴、肝脏等多种组织中表达.结论 THEM6基因在多种组织细胞中有广泛表达.
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