禽流感病毒H7N9人源性单链抗体文库的构建及鉴定

来源 :江苏预防医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：studentOfJXUFE

【摘要】

：

目的构建人源性禽流感病毒H7N9单链抗体文库(scFv),并对文库质量进行鉴定。方法分离11例H7N9恢复期患者外周血中的单个核淋巴细胞(PBMC),提取总RNA,逆转录成cDNA;并以此为模

【作者】

：

迟莹张文帅焦永军

【机构】

：

江苏省疾病预防控制中心

【出处】

：

江苏预防医学

【发表日期】

：

2019年6期

【关键词】

：

禽流感病毒H7N9 人源性单链抗体抗体文库(scFv) Avian influenza A H7N9 virusHuman single-chain frag

【基金项目】

：

国家自然科学基金青年基金(81601732),国家自然科学基金(31570926),江苏省疾病预防控制中心科教强业工程青年人才(JKRC2016018)

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目的构建人源性禽流感病毒H7N9单链抗体文库(scFv),并对文库质量进行鉴定。方法分离11例H7N9恢复期患者外周血中的单个核淋巴细胞(PBMC),提取总RNA,逆转录成cDNA;并以此为模板PCR扩增人源性抗体重链可变区(VH)及轻链可变区(Vκ),再通过重叠PCR法将VH和Vκ基因随机拼接成scFv文库;将构建的scFv文库克隆入噬菌体载体pComb3XSS中,电转化感受态细胞XL1-Blue,制备成完整的人源性禽流感病毒H7N9单链抗体文库;通过计算菌落数量及基因测序检测分析scFv文库的库容量及

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