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【摘要】目的对乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋体抗体（Hepatitis B virus surface antigen/Treponema pallidum antibody，HBsAg/TP）双联金标试剂的结果进行评价，探讨无偿献血者献血前进行HBsAg/TP双联金标试剂快速筛查的可行性。
方法采用HBsAg/TP双联金标试剂试纸条法、HBsAgELISA和TPELISA法对880份无偿献血者血液标本进行平行检测评估；对百色市中心血站2012～2015年无偿献血者血液标本HBsAg/TP常规筛查记录资料进行统计分析。
结果880份无偿献血者血液标本双联金标试纸条检测HBsAg/TP结果与ELISA法检测结果符合率为99.77%；采用HBsAg/TP双联金标试剂进行血液初筛后TP复检阳性率为0.72%，TP复检阳性率比较，差异有统计学意义（χ2=85.350，P<0.001）。
结论采用HBsAg/TP双联金标试剂进行无偿献血前筛查，可有效减少不合格血液的采集以及降低血液报废率，节约血液资源，值得广泛推广应用。
【关键词】乙型肝炎病毒；表面抗原/梅毒螺旋体抗体；无偿献血；筛查；应用
中图分类号：R446.1文献标识码：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2017.01.023
Application of double goldlabeled reagent in blood donation screening
[HJ1][HJ]
LU Jieling，ZHOU Zhengdong，MA Haiyan，TANG Yusheng，LI Yingling
（Guangxi Baise Blood Center，Baise 533000，China）
[HJ1*2][HJ]
【Abstract】ObjectiveTo evaluate results of double goldlabeled reagent in Hepatitis B virus surface antigen/Treponema pallidum antibody，so as to discuss feasibility of rapid screening of double goldlabeled reagent in unpaid blood donors before blood donation.
MethodsHBsAg/TP double gold labeled reagent test strip method，HBsAgELISA and TPELISA methods were put into use in parallel detection evaluation of blood samples from 880 blood donors.HBsAg/TP routine screening data of blood samples from blood donors from 2012 to 2015 in Baise City were statistically analyzed.
Results The coincidence rate of the test results of double gold labeled reagent with the methods of HBsAg/TP and ELISA from 880 blood samples was 99.77%，while the reexamination of TP positive rate was 0.72% after adopting HBsAg/TP double gold labeled reagent for blood screening.The positive rate of TP recheck was compared，and difference was statistically significant （χ2=85.350，P<0.001）.
ResultsHBsAg/TP double gold labeled reagent for blood donation before screening can effectively reduce collection of unqualified blood and reduce blood condemnation rate，it can also save blood resources.Therefore，it is worthy of wide application.
ConclusionThe use of HBsAg/TP double gold labeled reagent for blood donation before screening can effectively reduce the collection of unqualified blood and reduce the rate of blood scrap，as well as it can save blood resources.Therefore，it is worth wide application.
【Key words】hepatitis B virus；HBsAg/TP；unpaid blood donation；screening；application
近年來，无偿献血事业得到不断快速发展，随着各地市采供血量的不断增长，无偿献血人数越来越多，献血人群也越来越多元化。在无偿献血人群中发现梅毒检测阳性已经成为除乙肝外血液检测不合格而报废的主要原因[1～4]。百色市地处广西西部山区，与越南、贵州、云南接壤。2006～2009年百色市无偿献血梅毒检测阳性率约为1.27%[5]，在全国属于较高水平。为确保临床用血安全，减少血液报废率，笔者对HBsAg/TP双联金标试剂应用于献血初筛进行平行检测分析，现报告如下。 1资料与方法
1.1一般资料
收集2012～2015年百色市无偿献血者标本111 920份进行HBsAg/TP检测的记录资料；采用HBsAg/TP双联金标试剂试纸条法（实验组）、HBsAgELISA和TPELISA法（对照组）对880份无偿献血者标本进行HBsAg/TP平行检测。所有无偿献血者均符合《献血者健康检查要求》（GB18467-2011）中的要求。
1.2试剂
北京万泰公司提供的HBsAg金标试剂和HBsAg/TP酶联吸附法检测试剂盒；厦门新创公司提供的HBsAg/TP联合金标试剂和HBsAg/TP酶联吸附法检测试剂盒；室内质控品主要由北京康彻思坦公司提供。所有试剂和室内质控品均批批检测合格，在有效期内使用。
1.3仪器
Xantus150+AK03B全自动酶免加样器（深圳爱康公司），RSP150全自动加样器（瑞士帝肯公司），FAME24/20及FAME24/30全自动酶免处理系统（瑞士哈美顿公司），MK3酶标仪，美国伯乐洗板机，瑞士TACAN洗板机。
1.4方法
2012～2014年采用HBsAg金标试剂试纸条法对无偿献血者进行初筛，2015年起采用HBsAg/TP双联金标试剂试纸条法对无偿献血者进行初筛。每份血液标本均采用两种不同厂家的试剂盒进行初复检检测。HBsAg/TP双联金标试剂试纸条法、HBsAgELISA法和TPELISA法各试验均严格按照试剂操作说明和《血站技术操作规程》的要求进行。任一种试剂检测呈反应性的标本进行血辫子标本双孔复试，复试仍呈反应性者判为不合格。
1.5统计学方法
采用SPSS 13.0统计软件进行统计，以不同年份HBsAg/TP复检阳性率以及使用不同方法HBsAg/TP复检阳性例数数据为统计数据，采用配对资料χ2检验分析，检验水准：α=0.05。
2结果
2.1金标试纸条法与ELISA法检测HBsAg/TP结果
2015年采用双联金标试剂试纸条法与ELISA法对880份血液标本进行HBsAg/TP平行检测，金标试剂检测HBsAg阳性10例，TP阳性5例；而ELISA法检出HBsAg阳性12例，TP阳性7例。双联金标试纸条检测HBsAg/TP结果与ELISA法检测结果符合率为99.77%（878/880）。结果见表1。
2.2HBsAg/TP检测情况
2012～2015年共检测无偿献血者血液标本111 920份。其中复检结果HBsAg阳性例数为645例，阳性率为0.58%；TP阳性例数为802例，阳性率为0.72%，TP复检阳性率比较差异有统计学意义（P<0.001）。见表2。
表1不同方法对880份血液标本HBsAg/TP进行平行检测情况（n）
检测方法
ELISA法HBsAg阳性阴性TP阳性阴性
双联金标试剂试纸条法阳性10050
阴性28682873
合计128687873
χ20.5000.500
P0.4800.480
表22012～2015年百色市无偿献血HBsAg/TP检测情况[n（%）]
年份检测人数HBsAg阳性TP阳性
201224 867130（0.52）212（0.85）
201326 933151（0.56）229（0.85）
201429 054178（0.61）255（0.88）
201531 066186（0.60）106（0.34）
合计111 920645（0.58）802（0.72）
注：不同年份HBsAg复检阳性率比较，χ2=2.321，v=3，P>0.05；不同年份TP复检阳性率比较，χ2=85.350，v=3，P<0.001。
3讨论
当前，采用金标快速诊断试剂在无偿献血前进行初筛，可以明显降低输血传播疾病风险和减少血液报废率[6～9]。百色市中心血站自2002年起采用HBsAg金标试剂对无偿献血者进行初筛，在很大程度上降低了血液因复检不合格的报废率，但梅毒的复检阳性率却居高不下[5]，为了节约血液资源，我们采用HBsAg/TP双联金标试剂对880份无偿献血者血液标本进行检测评估。从表1的数据可以看出，双联金标试剂的检测结果与ELISA法的检测结果符合率为99.77%（878/880），结果相差无几；双联金标试纸条法漏检的2例阳性结果在ELISA法为弱阳性，两种检测方法分别检出的HBsAg/TP阳性结果差异不显著。有报道TP金标快速筛查试剂的灵敏度、特异性以及血液检测结果符合率与ELISA法结果差异无统计学意义[1，9]，说明HBsAg/TP双联金标试剂适用于无偿献血前的血液筛查。
从表2的结果可以看出，2012～2015年HBsAg复检阳性率约为0.58%，不同年份间HBsAg复检阳性率差异无统计学意义；2012～2015年TP复检阳性率约为0.72%，2012～2014年TP复检阳性率不显著，但2015年TP复检阳性率仅为0.34%，与其他年份的TP阳性率比较，差异明显。百色市中心血站自2015年起将HBsAg/TP双联金标试剂用于献血前的筛查工作，而表2的结果提示，百色市无偿献血者的TP复检阳性率从2014年的0.88%急剧下降至2015年的0.34%，证明了TP金标试纸条法在献血前筛查的应用取得了很好的效果。
本研究中所使用HBsAg/TP双联金标试剂采用胶体金免疫层析技术，可以快速定性检测人全血中乙肝表面抗原和梅毒螺旋体抗体，3～15分钟内观察结果，操作方法简便，通过有关文献报道和表1检测结果，表明HBsAg/TP双联金标试剂检测乙肝表面抗原和梅毒的灵敏度已经非常接近ELISA法的检测水平，非常符合献血前快速筛查的特点和要求。在处于滇、黔、桂三省区中心的百色山区城市的无偿献血者中使用HBsAg/TP双联金标试剂进行献血前筛查，不仅能大大减少不合格血液的采集，还有效地降低了血液报废率，避免宝贵的血液资源的浪费；同时也有助于进一步提高血液质量，确保临床用血安全，具有广泛而良好的社会效益和经济效益，对以后深入持久地开展无偿献血工作具有重要意义，值得推广应用。
参考文献
[1]刘宜仲，陈晓燕，黄守民，等.无偿献血前梅毒抗体快速筛查应用探讨[J].临床输血与检验，2014，16（2）：122124，128.
[2]黎淦平，刘宜仲.深圳西部2005～2011年献血者血液复检结果分析[J].国际检验医学杂志， 2013，34（6）：748750.
[3]黄守民，张健，刘宜仲，等.深圳市宝安区2004～2011年无偿献血者血液5项指标检验结果分析[J].检验医学与临床，2012，9（14）：17891790.
[4]尹恒，王乃红，卞鹰.中国部分地区无偿献血者梅毒感染情况比较分析[J].中国输血杂志，2011，24（1）：3133.
[5]李蓥玲.80 221份无偿献血者血清梅毒检出率分析[J].中国临床新医学，2010，3（8）：771773.
[6]古醒辉，熊文，叶贤林，等.乙肝/梅毒联合检测试纸条在献血前初筛的应用初探[J].中国输血杂志，2015，28（2）：193196.
[7]孟毓，岳献荣，赵新艳，等.HBsAg/TP联检试纸条用于采血前初筛的效果评价[J].中国输血杂志，2014，27（3）：278279.
[8]王紅梅.梅毒抗体胶体金法在街头献血者初筛中的应用及评价[J].中国输血杂志，2012，25（1）：6869.
[9]郑优荣，林茹，李仲平，等.HBsAg/TP/HIV抗体胶体金联合检测试剂在献血者筛查中的应用评价[J].国际输血及血液学杂志，2010，33（4）：296298.
（收稿日期：2016-08-12修回日期：2016-12-28）
（编辑：潘明志）
方法采用HBsAg/TP双联金标试剂试纸条法、HBsAgELISA和TPELISA法对880份无偿献血者血液标本进行平行检测评估；对百色市中心血站2012～2015年无偿献血者血液标本HBsAg/TP常规筛查记录资料进行统计分析。
结果880份无偿献血者血液标本双联金标试纸条检测HBsAg/TP结果与ELISA法检测结果符合率为99.77%；采用HBsAg/TP双联金标试剂进行血液初筛后TP复检阳性率为0.72%，TP复检阳性率比较，差异有统计学意义（χ2=85.350，P<0.001）。
结论采用HBsAg/TP双联金标试剂进行无偿献血前筛查，可有效减少不合格血液的采集以及降低血液报废率，节约血液资源，值得广泛推广应用。
【关键词】乙型肝炎病毒；表面抗原/梅毒螺旋体抗体；无偿献血；筛查；应用
中图分类号：R446.1文献标识码：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2017.01.023
Application of double goldlabeled reagent in blood donation screening
[HJ1][HJ]
LU Jieling，ZHOU Zhengdong，MA Haiyan，TANG Yusheng，LI Yingling
（Guangxi Baise Blood Center，Baise 533000，China）
[HJ1*2][HJ]
【Abstract】ObjectiveTo evaluate results of double goldlabeled reagent in Hepatitis B virus surface antigen/Treponema pallidum antibody，so as to discuss feasibility of rapid screening of double goldlabeled reagent in unpaid blood donors before blood donation.
MethodsHBsAg/TP double gold labeled reagent test strip method，HBsAgELISA and TPELISA methods were put into use in parallel detection evaluation of blood samples from 880 blood donors.HBsAg/TP routine screening data of blood samples from blood donors from 2012 to 2015 in Baise City were statistically analyzed.
Results The coincidence rate of the test results of double gold labeled reagent with the methods of HBsAg/TP and ELISA from 880 blood samples was 99.77%，while the reexamination of TP positive rate was 0.72% after adopting HBsAg/TP double gold labeled reagent for blood screening.The positive rate of TP recheck was compared，and difference was statistically significant （χ2=85.350，P<0.001）.
ResultsHBsAg/TP double gold labeled reagent for blood donation before screening can effectively reduce collection of unqualified blood and reduce blood condemnation rate，it can also save blood resources.Therefore，it is worthy of wide application.
ConclusionThe use of HBsAg/TP double gold labeled reagent for blood donation before screening can effectively reduce the collection of unqualified blood and reduce the rate of blood scrap，as well as it can save blood resources.Therefore，it is worth wide application.
【Key words】hepatitis B virus；HBsAg/TP；unpaid blood donation；screening；application
近年來，无偿献血事业得到不断快速发展，随着各地市采供血量的不断增长，无偿献血人数越来越多，献血人群也越来越多元化。在无偿献血人群中发现梅毒检测阳性已经成为除乙肝外血液检测不合格而报废的主要原因[1～4]。百色市地处广西西部山区，与越南、贵州、云南接壤。2006～2009年百色市无偿献血梅毒检测阳性率约为1.27%[5]，在全国属于较高水平。为确保临床用血安全，减少血液报废率，笔者对HBsAg/TP双联金标试剂应用于献血初筛进行平行检测分析，现报告如下。 1资料与方法
1.1一般资料
收集2012～2015年百色市无偿献血者标本111 920份进行HBsAg/TP检测的记录资料；采用HBsAg/TP双联金标试剂试纸条法（实验组）、HBsAgELISA和TPELISA法（对照组）对880份无偿献血者标本进行HBsAg/TP平行检测。所有无偿献血者均符合《献血者健康检查要求》（GB18467-2011）中的要求。
1.2试剂
北京万泰公司提供的HBsAg金标试剂和HBsAg/TP酶联吸附法检测试剂盒；厦门新创公司提供的HBsAg/TP联合金标试剂和HBsAg/TP酶联吸附法检测试剂盒；室内质控品主要由北京康彻思坦公司提供。所有试剂和室内质控品均批批检测合格，在有效期内使用。
1.3仪器
Xantus150+AK03B全自动酶免加样器（深圳爱康公司），RSP150全自动加样器（瑞士帝肯公司），FAME24/20及FAME24/30全自动酶免处理系统（瑞士哈美顿公司），MK3酶标仪，美国伯乐洗板机，瑞士TACAN洗板机。
1.4方法
2012～2014年采用HBsAg金标试剂试纸条法对无偿献血者进行初筛，2015年起采用HBsAg/TP双联金标试剂试纸条法对无偿献血者进行初筛。每份血液标本均采用两种不同厂家的试剂盒进行初复检检测。HBsAg/TP双联金标试剂试纸条法、HBsAgELISA法和TPELISA法各试验均严格按照试剂操作说明和《血站技术操作规程》的要求进行。任一种试剂检测呈反应性的标本进行血辫子标本双孔复试，复试仍呈反应性者判为不合格。
1.5统计学方法
采用SPSS 13.0统计软件进行统计，以不同年份HBsAg/TP复检阳性率以及使用不同方法HBsAg/TP复检阳性例数数据为统计数据，采用配对资料χ2检验分析，检验水准：α=0.05。
2结果
2.1金标试纸条法与ELISA法检测HBsAg/TP结果
2015年采用双联金标试剂试纸条法与ELISA法对880份血液标本进行HBsAg/TP平行检测，金标试剂检测HBsAg阳性10例，TP阳性5例；而ELISA法检出HBsAg阳性12例，TP阳性7例。双联金标试纸条检测HBsAg/TP结果与ELISA法检测结果符合率为99.77%（878/880）。结果见表1。
2.2HBsAg/TP检测情况
2012～2015年共检测无偿献血者血液标本111 920份。其中复检结果HBsAg阳性例数为645例，阳性率为0.58%；TP阳性例数为802例，阳性率为0.72%，TP复检阳性率比较差异有统计学意义（P<0.001）。见表2。
表1不同方法对880份血液标本HBsAg/TP进行平行检测情况（n）
检测方法
ELISA法HBsAg阳性阴性TP阳性阴性
双联金标试剂试纸条法阳性10050
阴性28682873
合计128687873
χ20.5000.500
P0.4800.480
表22012～2015年百色市无偿献血HBsAg/TP检测情况[n（%）]
年份检测人数HBsAg阳性TP阳性
201224 867130（0.52）212（0.85）
201326 933151（0.56）229（0.85）
201429 054178（0.61）255（0.88）
201531 066186（0.60）106（0.34）
合计111 920645（0.58）802（0.72）
注：不同年份HBsAg复检阳性率比较，χ2=2.321，v=3，P>0.05；不同年份TP复检阳性率比较，χ2=85.350，v=3，P<0.001。
3讨论
当前，采用金标快速诊断试剂在无偿献血前进行初筛，可以明显降低输血传播疾病风险和减少血液报废率[6～9]。百色市中心血站自2002年起采用HBsAg金标试剂对无偿献血者进行初筛，在很大程度上降低了血液因复检不合格的报废率，但梅毒的复检阳性率却居高不下[5]，为了节约血液资源，我们采用HBsAg/TP双联金标试剂对880份无偿献血者血液标本进行检测评估。从表1的数据可以看出，双联金标试剂的检测结果与ELISA法的检测结果符合率为99.77%（878/880），结果相差无几；双联金标试纸条法漏检的2例阳性结果在ELISA法为弱阳性，两种检测方法分别检出的HBsAg/TP阳性结果差异不显著。有报道TP金标快速筛查试剂的灵敏度、特异性以及血液检测结果符合率与ELISA法结果差异无统计学意义[1，9]，说明HBsAg/TP双联金标试剂适用于无偿献血前的血液筛查。
从表2的结果可以看出，2012～2015年HBsAg复检阳性率约为0.58%，不同年份间HBsAg复检阳性率差异无统计学意义；2012～2015年TP复检阳性率约为0.72%，2012～2014年TP复检阳性率不显著，但2015年TP复检阳性率仅为0.34%，与其他年份的TP阳性率比较，差异明显。百色市中心血站自2015年起将HBsAg/TP双联金标试剂用于献血前的筛查工作，而表2的结果提示，百色市无偿献血者的TP复检阳性率从2014年的0.88%急剧下降至2015年的0.34%，证明了TP金标试纸条法在献血前筛查的应用取得了很好的效果。
本研究中所使用HBsAg/TP双联金标试剂采用胶体金免疫层析技术，可以快速定性检测人全血中乙肝表面抗原和梅毒螺旋体抗体，3～15分钟内观察结果，操作方法简便，通过有关文献报道和表1检测结果，表明HBsAg/TP双联金标试剂检测乙肝表面抗原和梅毒的灵敏度已经非常接近ELISA法的检测水平，非常符合献血前快速筛查的特点和要求。在处于滇、黔、桂三省区中心的百色山区城市的无偿献血者中使用HBsAg/TP双联金标试剂进行献血前筛查，不仅能大大减少不合格血液的采集，还有效地降低了血液报废率，避免宝贵的血液资源的浪费；同时也有助于进一步提高血液质量，确保临床用血安全，具有广泛而良好的社会效益和经济效益，对以后深入持久地开展无偿献血工作具有重要意义，值得推广应用。
参考文献
[1]刘宜仲，陈晓燕，黄守民，等.无偿献血前梅毒抗体快速筛查应用探讨[J].临床输血与检验，2014，16（2）：122124，128.
[2]黎淦平，刘宜仲.深圳西部2005～2011年献血者血液复检结果分析[J].国际检验医学杂志， 2013，34（6）：748750.
[3]黄守民，张健，刘宜仲，等.深圳市宝安区2004～2011年无偿献血者血液5项指标检验结果分析[J].检验医学与临床，2012，9（14）：17891790.
[4]尹恒，王乃红，卞鹰.中国部分地区无偿献血者梅毒感染情况比较分析[J].中国输血杂志，2011，24（1）：3133.
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[9]郑优荣，林茹，李仲平，等.HBsAg/TP/HIV抗体胶体金联合检测试剂在献血者筛查中的应用评价[J].国际输血及血液学杂志，2010，33（4）：296298.
（收稿日期：2016-08-12修回日期：2016-12-28）
（编辑：潘明志）