【摘 要】
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为进一步优化细胞外基质,建立胚胎干细胞（embryonic stem cells,ESCs）稳定的体外培养体系,试验分别采用小鼠胚胎成纤维细胞（mouse embryonic fibroblasts,MEFs）饲养层、基质胶（Matrigel）和贴附因子（attachment factor,AF）细胞培养板,以N2B27为基础培养基,评估和比较不同处理对小鼠ESCs（mESCs）自我更新及多能性维
【基金项目】
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江苏省农业科技自主创新基金项目（CX（19）2037）；
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为进一步优化细胞外基质,建立胚胎干细胞（embryonic stem cells,ESCs）稳定的体外培养体系,试验分别采用小鼠胚胎成纤维细胞（mouse embryonic fibroblasts,MEFs）饲养层、基质胶（Matrigel）和贴附因子（attachment factor,AF）细胞培养板,以N2B27为基础培养基,评估和比较不同处理对小鼠ESCs（mESCs）自我更新及多能性维持的影响。结果表明:在KSR浓度为5%的N2B27培养基中,MEFs饲养层的mESCs形态立体,边缘清晰,呈规则的圆顶状; Matrigel、AF细胞培养板培养的mESCs形态立体,呈集落样生长。MEFs饲养层培养的mESCs传代后黏附快,集落形成显著快于Matrigel、AF细胞培养板,AF细胞培养板培养的mESCs黏附少,集落形成慢。免疫荧光染色结果显示,3种处理的mESCs均表达Oct4和Sox2蛋白,但AF细胞培养板培养的mESCs中Oct4、Sox2和Nanog的转录表达水平低于Matrigel细胞培养板,其中Sox2和Nanog差异显著或极显著（P <0.05或P <0.01）。说明AF可用于mESCs培养,但在细胞黏附、增殖速率及多能因子表达上与MEFs、Matrigel有差异。
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