【摘 要】
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目的:研究外源性基因PTEN对人类大肠癌LS1747细胞周期及凋亡的影响.方法:以携带有PTEN基因的真核表达载体体外转染人类大肠腺癌细胞LS1747,筛选阳性克隆的细胞并扩增培养,鉴
【机 构】
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中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心,长沙,410008
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目的:研究外源性基因PTEN对人类大肠癌LS1747细胞周期及凋亡的影响.方法:以携带有PTEN基因的真核表达载体体外转染人类大肠腺癌细胞LS1747,筛选阳性克隆的细胞并扩增培养,鉴定转染成功后采用流式细胞仪、透射电镜、DNA琼脂糖电泳,检测转染PTEN基因后LS1747细胞的凋亡以及观察三种细胞生长曲线.结果:流式细胞仪显示,细胞周期从G1期到S期发生抑制,并在G1期峰前出现1个明显的凋亡峰.透射电镜下可见转染PTEN基因后细胞核染色质浓缩边集、胞浆浓缩、核碎裂及凋亡小体形成等典型的凋亡表现.细胞核DNA琼脂糖凝胶电泳显示凋亡细胞特有的“梯状”条带.转染空载体及未转染的LS1747细胞未见凋亡表现.转染PTEN的LS1747细胞与空白质粒载体转染的LS1747细胞和LS1747细胞的生长速度相比,后两者生长速度较快.结论:将外源性PTEN基因导入LS1747细胞后,可以抑制细胞周期,并可诱导细胞凋亡,这可能是PTEN基因抑制大肠癌细胞增殖的重要机制之一.
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