【摘 要】
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目的 基于腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路探究膝痹宁方（XBN）对膝骨关节炎（KOA）模型大鼠的改善作用机制。方法 将36只大鼠随机分为空白组、模型组、XBN组（12.56 g/kg）、XBN+二甲双胍（AMPK激动剂）组[12.56 g/kg XBN+100 mg/kg二甲双胍]，每组9只。除空白组外，其余各组大鼠均通过离断前交叉韧带的方法复制KOA模型
【机 构】
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南京中医药大学附属医院/江苏省中医院骨伤科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（No.81904224）； 江苏省中医院高峰学术人才项目（No.y2021rc02）； 苏州市“科教兴卫”青年科技项目（No.KJXW2020045）；
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目的 基于腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路探究膝痹宁方（XBN）对膝骨关节炎（KOA）模型大鼠的改善作用机制。方法 将36只大鼠随机分为空白组、模型组、XBN组（12.56 g/kg）、XBN+二甲双胍（AMPK激动剂）组[12.56 g/kg XBN+100 mg/kg二甲双胍]，每组9只。除空白组外，其余各组大鼠均通过离断前交叉韧带的方法复制KOA模型。造模成功后，各组大鼠给予相应药物/生理盐水，XBN和生理盐水每天灌胃1次，二甲双胍隔天腹腔注射1次，连续4周。观察大鼠软骨组织病理形态学变化并进行Mankin评分，检测大鼠软骨组织中聚集蛋白聚糖（Aggrecan）的表达水平，血小板反应蛋白解整合素金属肽酶4（ADAMTS-4）、ADAMTS-5、基质金属蛋白酶3（MMP-3）、MMP-13的mRNA和蛋白表达水平，及AMPK、mTOR蛋白的磷酸化水平。结果 与空白组比较，模型组大鼠软骨组织结构分层紊乱，软骨层基质淡染，潮线出现扭曲或中断，Mankin评分显著升高（P＜0.05）；软骨组织中Aggrecan蛋白表达水平和AMPK蛋白的磷酸化水平均显著降低（P＜0.05）,ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-3、MMP-13 mRNA和蛋白的表达水平以及mTOR蛋白的磷酸化水平均显著升高（P＜0.05）。与模型组比较，各给药组大鼠软骨病理形态学变化明显改善，上述评分或指标水平均显著逆转（P＜0.05）。与XBN组比较，XBN+二甲双胍组大鼠软骨病变程度进一步减轻，上述评分或指标水平进一步改善（P＜0.05）。结论 XBN可改善KOA模型大鼠的软骨损伤，促进软骨合成，减少软骨降解，其作用机制可能与激活AMPK/mTOR信号通路有关。
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