磷酸肌酸对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注时细胞凋亡的影响

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目的 探讨磷酸肌酸对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注时细胞凋亡的影响.方法 雄性SD大鼠,体重150~170 g,采用高脂饲养联合腹腔注射链脲佐菌素的方法制备糖尿病模型,造模成功的27只大鼠饲养2周后,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=9):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)和磷酸肌酸组(PP组).I/R组和PP组采用结扎左冠状动脉前降支30 min再灌注2 h的方法制备心肌缺血再灌注模型,PP组于缺血前30 min腹腔注射磷酸肌酸1g/kg,I/R组给予等容量生理盐水.再灌注2 h时采集静脉血样,测定血浆肌钙蛋白T(cTnT)的浓度,然后处死大鼠,取心肌组织,采用免疫组化法测定Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的水平,并计算Bcl-2与Bax表达的比值(Bcl-2/Bax 比),采用TUNEL染色法检测细胞凋亡情况,计算凋亡指数(AI);电镜下观察心肌细胞超微结构.结果 与S组比较,I/R组血浆cTnT浓度升高,心肌组织Bcl-2、Bax和Caspase-3表达上调,Bcl-2/Bax比降低,AI升高(P<0.05或0.01);与I/R组比较,PP组血浆cTnT浓度降低,心肌组织Bcl-2表达上调,Bax和Caspase-3表达下调,Bcl-2/Bax比升高,AI降低(P<0.01).PP组心肌病理学损伤程度轻于I/R组.结论 磷酸肌酸可抑制细胞凋亡,从而减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制与上调Bcl-2表达、下调Bax和Caspase-3的表达有关.
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