【摘 要】
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目的对大鼠膝关节软骨细胞进行分离和培养,观察大鼠软骨细胞的形态学变化。方法通过酶消化法获得大鼠膝关节软骨细胞并进行传代培养;利用倒置相差显微镜观察各代软骨细胞形态
【机 构】
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泉州医学高等专科学校药学院,华侨大学生物医学学院,中国人民解放军第二军医大学药学院
【基金项目】
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国家自然科学基金联合基金项目(U1405215);福建省自然科学基金资助项目(2015J01364)
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目的对大鼠膝关节软骨细胞进行分离和培养,观察大鼠软骨细胞的形态学变化。方法通过酶消化法获得大鼠膝关节软骨细胞并进行传代培养;利用倒置相差显微镜观察各代软骨细胞形态变化;采用CCK-8法检测软骨细胞增殖能力,利用紫外分光光度法获得OD值评价软骨细胞生长趋势;采用细胞免疫荧光法检测Ⅱ型胶原表达情况,在荧光倒置相差显微镜下对软骨细胞进行鉴定。结果在酶消化下可获得高纯度软骨细胞,原代细胞多数呈多角形,细胞形态随传代次数增加有变梭形趋势,细胞活力在第三代之后明显减弱,细胞免疫荧光检测显示胶原Ⅱ高表达。结论成功获得大鼠膝关节软骨细胞并进行形态学的观察比较,P3代前的软骨细胞相对稳定,进行软骨细胞相关研究采用P0至P3代软骨细胞为宜。
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