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目的明确我院分离的流感嗜血杆菌（H1）氨苄西林耐药的基因。方法用E试验测定我院上呼吸道感染患儿鼻咽部分离300株HI对氨苄西林耐药情况；以Nitrocdin纸片检测β内酰胺酶；PCR扩增及序列分析确定产酶株的基因型。结果32株氨苄西林耐药株均产β内酰胺酶，占总菌株数11％（32／300），PCR检测出TEM-131株，ROB-11株。结论产β内酰胺酶是H1对氨苄西林耐药的重要机制，TEM-1型是β内酰胺酶主要基因型，ROB-1型β内酰胺酶也首次被检出，值得关注和长期监测。