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目的：用改良方法对小鼠睾丸支持细胞进行体外快速分离与培养，以期建立一种简单快捷纯度高的支持细胞原代培养方法。方法：用0．25％胰蛋白酶和0．1％胶原酶，对睾丸组织进行次第消化，用福尔根染色法和免疫细胞化学方法鉴定睾丸支持细胞。结果：细胞培养72h存活率超过90％，纯度在85％以上。福尔根染色和免疫细胞化学染色结果示，分离细胞有卫星核小体存在，且细胞中FasL阳性表达，表明分离培养的细胞确为睾丸支持细胞。结论：睾丸组织经曲细精管分离后进行胶原酶和胰蛋白酶次第消化，可快速高效分离睾丸支持细胞。