【摘 要】
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目的:通过杂交技术获得能表达GAD67 -GFP的fmr1基因敲除小鼠模型.方法:fmr1基因敲除(fmr1-ko)雌性小鼠(X-X-)和GAD67-GFP敲入基因杂合雄性小鼠(2+2-)杂交.鼠尾巴提取基因组DN
【机 构】
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广州医学院第二附属医院神经病学研究所,广东广州,510260
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目的:通过杂交技术获得能表达GAD67 -GFP的fmr1基因敲除小鼠模型.方法:fmr1基因敲除(fmr1-ko)雌性小鼠(X-X-)和GAD67-GFP敲入基因杂合雄性小鼠(2+2-)杂交.鼠尾巴提取基因组DNA,用PCR方法鉴定所有子代基因型.对杂交后代小鼠进行行为学观察,并行脑组织切片观察绿色荧光蛋白在γ-氨基丁酸能神经元的表达.结果:PCR方法证实通过杂交繁殖出四种基因型小鼠:同时带有杂合fmr1 ko及GAD67-GFP位点的雌性小鼠(X+ X-/2 +2-)、带有纯合fmr1-ko及GAD67-GFP位点的雄性小鼠(X-Y/2 +2-)、不带有GAD67-GFP的雌性和雄性小鼠(X+X-/2-2-,X-Y/2-2-).观察发现X-Y/2+2-小鼠具有fmr1 -ko小鼠类似的行为学表现,同时在显微镜下观察到X-Y/2+2-小鼠脑组织切片有发绿色荧光的GABA神经元.结论:该杂交小鼠成功表达了GAD67-GFP,为研究γ-氨基丁酸能神经元在脆性X综合征发病机制中的作用提供一种可靠的模型.
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