p38α半胱氨酸点突变体真核表达载体的构建和表达

来源 :实验室科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：pldpl

【摘要】

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以pFLAG-CMV-5.1-p38α为模板,应用PCR定点突变技术将p38α的第39、119、162和211位半胱氨酸（Cys）点突变体定点突变为丙氨酸（Ala）（C39A、C119A、C162A、C211A）,使用琼脂糖凝胶电泳

【作者】

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岳军齐素华

【机构】

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徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心

【出处】

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实验室科学

【发表日期】

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2015年1期

【关键词】

：

p38α 真核表达载体 HEK293细胞 p38α eukaryotic expression vector HEK293 cell

【基金项目】

：

江苏省高校自然科学研究计划（项目编号：13KJA310005,11KJB310012）, 2011年江苏省大学创新计划项目（项目编号：990）

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以pFLAG-CMV-5.1-p38α为模板,应用PCR定点突变技术将p38α的第39、119、162和211位半胱氨酸（Cys）点突变体定点突变为丙氨酸（Ala）（C39A、C119A、C162A、C211A）,使用琼脂糖凝胶电泳及基因测序检测其结果;并采用脂质体转染法将p38α的野生型和突变体质粒分别转入HEK293细胞,免疫印迹鉴定野生型及其突变体p38蛋白表达。结果显示,构建的C39ApFLAG-CMV-5.1、C119ApFLAGCMV-5.1、C162ApFLAG-CMV-5.1和C211Ap

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