【摘 要】
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目的 探讨海参糖胺聚糖(hGAG)与放疗单独或联合应用对人肺腺癌A549细胞的增殖抑制作用及促凋亡作用机制.方法 培养人肺腺癌A549细胞至对数生长期,随机分为对照组、hGAG组、放
【机 构】
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青岛大学附属医院呼吸与危重症科,山东青岛266003
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目的 探讨海参糖胺聚糖(hGAG)与放疗单独或联合应用对人肺腺癌A549细胞的增殖抑制作用及促凋亡作用机制.方法 培养人肺腺癌A549细胞至对数生长期,随机分为对照组、hGAG组、放射组、联合组(hGAG联合放射处理).CCK-8法测定不同处理组细胞的增殖抑制率;Hoechst 33258法对实验细胞进行染色并观察细胞凋亡的形态学变化;AnnexinV-FITC/PI双染法联合流式细胞术检测凋亡状况;蛋白印迹法(Western blot)测定各个组细胞survivin、Bax、Bcl-2及caspase-3 4种凋亡蛋白的相对表达量.结果 CCK-8结果显示,24、48和72 h各时间段hGAG组、放射组、联合组细胞的增殖抑制率均高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);24、48和72 h各时间段联合组细胞的增殖抑制率亦均高于放射组,差异均有统计学意义(P＜0.05).Hoechst33258染色示hGAG组、放射组及联合组在镜下均可见凋亡细胞呈现核碎裂、核固缩现象,细胞呈现为染色浓密的状态,联合组较放射组更为明显.AnnexinV-FITC/PI双染法联合流式细胞术检测显示:3个实验组的细胞总凋亡率较对照组高(P＜0.05),联合组的细胞总凋亡率显著高于放射组(P＜0.05).Western blot示3个实验组与对照组比较,以及联合组与放射组相比,蛋白Bax、caspase-3的表达水平升高,蛋白Bcl-2、survivin的表达水平降低(均P＜0.05).结论 hGAG可有效抑制肺腺癌A549细胞的增殖并促进其凋亡,并且可以增强A549细胞系对射线的敏感性,推测其作用机制可能与caspase-3蛋白和Bax蛋白表达上调,以及survivin蛋白、Bcl-2蛋白的表达下调有关.
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