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摘要：目的 ：探究不明原因不孕症患者的子宫内膜血管内皮生长因子（VEGF）的表达及其与体内性激素的关系。 方法： 选取我院收治的不明原因不孕症患者28例，分为观察组和HCG组，每组14例； 同时选取健康女性14例作为对照组； 观察组为不明原因的不孕症患者，HCG组为使用HCG的不明原因不孕症患者。采用同位素放免法测定FSH、LH、E2、T、P、PRL等各项指标情况，观察三组子宫内膜分泌期VEGF的表达情况。结果： 本次研究中，对照组健康女性VEGF的阳性率最高为100%，观察组患者的VEGF阳性率最低为50.0%，观察组和HCG组间分泌期E2值、P值比较，差异具有统计学意义（P<0.05），说明HCG组分泌期的E2值、P值高于观察组，E2/P值低于观察组，对照组的E2值、P值高于观察组，差异有统计学意义。 观察组和对照组两组分泌期VEGF与月经周期第3天FSH、LH、E2、T、PRL和分泌期的E2、P、E2/P值进行Spearmans等级相关分析，结果显示，VEGF与不同时期各项激素值间的相关无统计学意义，提示VEGF表达与激素水平无关。 结论 ：不明原因不孕症的原因可能与VEGF有关，分泌期雌、孕激素水平较低可能是不孕的病因，而临床应用HCG治疗可提高机体VEGF的阳性率。
关键词：不明原因不孕症；血管内皮生长因子；子宫内膜；激素
近些年，随着社会的发展，不孕症的发病率逐年升高，尤其是不明原因的不孕症，约占所有不孕症的17%，严重影响了女性的健康和生活[1]。因此，探究血管生成在胚胎置入和早期胚胎发育中具有重要的临床意义[2]。本次研究对不明原因不孕症患者子宫内膜的VEGF表达进行探析，现报告如下。
1资料和方法
1.1一般资料 我院2013年12月-2014年12月收治不明原因不孕症患者28例，年龄25-40岁，平均年龄（37.8±3.6）岁，将28例患者分为观察组和HCG组，每组14例。同时选取健康女性14例作为对照组。入选标准：符合中华医学会制定的关于不孕症的诊断标准[3]，经各项临床检查结合临床症状确诊为不明原因不孕症，诊断标准：①妇科检查、B超检查未出现生殖器解剖结构异常；②6个月内女性输卵管通液或输卵管碘油造影显示双侧输卵管通畅；③血、宫颈分泌物抗精子抗体为阴性。；④腹腔镜检查未发现女性盆腔异常；⑤月经第3天激素各项指标检查正常，阴道B超监测两个周期卵泡正常，排卵正常；⑥男方生殖器官检查无畸形、无性功能异常、精液检查正常等。HCG组患者均符合上述诊断标准，同时加用HCG（在取内膜周期，经阴道B超监测卵泡发育，当卵泡直径≧18cm当日给予肌肉注射HCG10000U）。14例健康女性选取标准：①年龄25-40岁，具有正常的月经周期，周期为26-32d；②3个月内无激素使用史；③无宫内节育器；④有正常的妊娠和分娩史。三组女性的年龄、月经情况等一般情况比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 方法 ①获取内膜：三组女性均于月经周期的第19-23天取分泌期的子宫内膜，观察组和对照组根据女性的月经周期长短决定获取内膜的时间，而HCG组女性经监测排卵后6-7天获取内膜；②测定激素：三组女性均于月经的第3-5天、分泌期内取内膜日抽取肘静脉血3ml，采用同位素放免法测定FSH、LH、E2、T、P、PRL等各项指标情况。③采用免疫组织化学链霉素抗生素蛋白-过氧化酶连接法（S-P法）检测血管内皮细胞生长因子（VEGF）在子宫内膜中的表达。所用试剂为即用型鼠抗人VEGF单克隆抗体，即用型免疫组化超敏U1tosensitiveTMS-P试剂盒均选自福州迈新公司。
1.3统计学处理分析 采用SPSS14.0软件系统分析所有数据，计量资料采用X±S表示，组间比较采用t检验，p<0.05则具有统计学差异。
2 结果
2.1 三组女性VEGF表达的比较 本次研究中，对照组健康女性VEGF的阳性率最高为100%，HCG组的VEGF阳性率为85.7%，观察组患者的VEGF阳性率最低为50.0%，结果具有统计学差异（P<0.05）。
2.2三组女性激素水平的比较 通过三组激素水平的研究显示，观察组和HCG组间分泌期E2值、P值比较，差异具有统计学意义（P<0.05），说明HCG组分泌期的E2值、P值高于观察组，E2/P值低于观察组，而增生期的各项激素均值差异有统计学意义；对照组的E2值、P值高于观察组，差异有统计学意义。见表1、表2。
表1 三组激素水平的比较（X±S）
表2 三组激素水平的比较（X±S）
①表示为分泌期血中激素值
2.3观察组和对照组VEGF表达与激素的关系 两组VEGF与月经周期第3天FSH、LH、E2、T、PRL和分泌期的E2、P、E2/P值进行Spearmans等级相关分析，结果显示，VEGF与不同时期各项激素值间的相关无统计学意义，提示VEGF表达与激素水平无关，见表3、表4。
表3 两组VEGF表达与激素的相关系数
表4 两组VEGF表达与激素的相关系数
3 讨论
不孕症是临床妇科的疑难疾病之一，近些年该病呈逐年上升趋势，严重影响了女性的健康和生活，给女性带来了一定的痛苦。临床研究不孕症的病因，主要分为几类：①排卵障碍；②输卵管因素；③男性因素；④不明原因；其中不明原因不孕症占所有不孕症的17%。而不明原因不孕症主要从两个方面进行研究分析，一是受精方面，二是胚胎着床方面。现有研究表明，子宮内膜的调控中，月经周期中的VEGF与受体分泌表达增强，这一时期是内膜容受胚胎的着床期，胚胎着床则是建立妊娠的第一步，成功与否依赖于子宫内膜的良好环境[4]。本次研究主要探讨不明原因的不孕症患者子宫内膜VEGF的表达及体内激素的关系，有研究认为，子宫血管生成过程中的血管内皮生长因子（VEGF）具有重要的作用。无论是子宫内膜修复的增值早期还是容受胚胎着床的分泌期，VEGF均有较高的表达。围着床期VEGF增多，可能有助于提高子宫内膜的容受性，以利于胚胎着床和早期绒毛血管的形成。生殖学家为寻找不明原因在有关子宫内膜血管变化、免疫功能及复杂的内膜生化改变与着床之间的关系，做了许多方面的研究，本研究假设两者之间的关系，同时观察到胚胎围着床期，不明原因不孕症的子宫内膜VEGF表达低于正常对照组。这一结果提示VEGF可能与不明原因不孕症发病有关[5-7]。而VEGF与激素的关系，则有大量研究表明VEGF及受体受缺氧、一氧化氮、细胞因子及细胞分化等因素调控，有动物实验和体外子宫内膜培养中发现，雌激素对VEGF和受体存在上调作用，而肌注HCG后，女性分泌期的黄体组织与未注射相比，前者黄体组织中VEGF的显色区域明显增加，可认为HCG同样对VEGF有调控作用。本次研究与文献报道一致。本次研究中结果显示：对照组健康女性VEGF的阳性率最高为100%，观察组患者的VEGF阳性率最低为50.0%，观察组和HCG组间分泌期E2值、P值比较，差异具有统计学意义（P<0.05），说明HCG组分泌期的E2值、P值高于观察组，E2/P值低于观察组，而增生期的各项激素均值差异有统计学意义；观察组和对照组分泌期的E2值、P值相比较，差异具有统计学意义（P<0.05），说明对照组的E2值、P值高于观察组。观察组和对照组两组VEGF与月经周期第3天FSH、LH、E2、T、PRL和分泌期的E2、P、E2/P值进行Spearmans等级相关分析，结果显示，VEGF与不同时期各项激素值间的相关无统计学意义，提示VEGF表达与激素水平无关。综上所述，不明原因不孕症的原因可能与VEGF有关，分泌期雌、孕激素水平较低可能是不孕的病因，而临床应用HCG治疗可提高机体VEGF的阳性率。
参考文献：
[1]付志红，朱文杰，刘锦，周永红，等口服避孕药对高FSH不孕症患者子宫内膜容受性的影响[J].中国计划生育学杂志，2013，21（4）：69.
[2]孙兆贵，高敏芝，赵晓明，等.卵泡液和血清EG-VEGF、VEGF和TGF-β1水平与IVF妇女卵巢反应的关系及其对妊娠结局的预测价值[J].上海交通大学学报（医学版），2013，33（2）：12.
[3]马楠，范蕊.子宫内膜异位症患者血清中VEGF和IGF-I的表达及其相关性[J].中国妇幼保健，2012，27（21）：75-76.
[4]田喜凤，王振荣.卵泡液中VEGF水平对体外受精-胚胎移植临床结局的影响[J].现代检验医学杂志，2012，27（6）：107-108.
[5]耿玉敏，王燕，刘惠敏，等.不孕症女性血清抗精子抗体、抗子宫内膜抗体及抗苗勒管激素的改变[J].中国综合临床，2012，28（11）：145-147.
[6]陆国健，胡丽梅.女性不孕症患者的激素指标特征与临床诊断价值分析[J].检验医学与临床，2014，30（15）：45-46.
[7]肖琪，曹炎.经阴道超声监测药物治疗不孕症的临床价值[J].中国医药指南，2013，12（17）：107-108.
关键词：不明原因不孕症；血管内皮生长因子；子宫内膜；激素
近些年，随着社会的发展，不孕症的发病率逐年升高，尤其是不明原因的不孕症，约占所有不孕症的17%，严重影响了女性的健康和生活[1]。因此，探究血管生成在胚胎置入和早期胚胎发育中具有重要的临床意义[2]。本次研究对不明原因不孕症患者子宫内膜的VEGF表达进行探析，现报告如下。
1资料和方法
1.1一般资料 我院2013年12月-2014年12月收治不明原因不孕症患者28例，年龄25-40岁，平均年龄（37.8±3.6）岁，将28例患者分为观察组和HCG组，每组14例。同时选取健康女性14例作为对照组。入选标准：符合中华医学会制定的关于不孕症的诊断标准[3]，经各项临床检查结合临床症状确诊为不明原因不孕症，诊断标准：①妇科检查、B超检查未出现生殖器解剖结构异常；②6个月内女性输卵管通液或输卵管碘油造影显示双侧输卵管通畅；③血、宫颈分泌物抗精子抗体为阴性。；④腹腔镜检查未发现女性盆腔异常；⑤月经第3天激素各项指标检查正常，阴道B超监测两个周期卵泡正常，排卵正常；⑥男方生殖器官检查无畸形、无性功能异常、精液检查正常等。HCG组患者均符合上述诊断标准，同时加用HCG（在取内膜周期，经阴道B超监测卵泡发育，当卵泡直径≧18cm当日给予肌肉注射HCG10000U）。14例健康女性选取标准：①年龄25-40岁，具有正常的月经周期，周期为26-32d；②3个月内无激素使用史；③无宫内节育器；④有正常的妊娠和分娩史。三组女性的年龄、月经情况等一般情况比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 方法 ①获取内膜：三组女性均于月经周期的第19-23天取分泌期的子宫内膜，观察组和对照组根据女性的月经周期长短决定获取内膜的时间，而HCG组女性经监测排卵后6-7天获取内膜；②测定激素：三组女性均于月经的第3-5天、分泌期内取内膜日抽取肘静脉血3ml，采用同位素放免法测定FSH、LH、E2、T、P、PRL等各项指标情况。③采用免疫组织化学链霉素抗生素蛋白-过氧化酶连接法（S-P法）检测血管内皮细胞生长因子（VEGF）在子宫内膜中的表达。所用试剂为即用型鼠抗人VEGF单克隆抗体，即用型免疫组化超敏U1tosensitiveTMS-P试剂盒均选自福州迈新公司。
1.3统计学处理分析 采用SPSS14.0软件系统分析所有数据，计量资料采用X±S表示，组间比较采用t检验，p<0.05则具有统计学差异。
2 结果
2.1 三组女性VEGF表达的比较 本次研究中，对照组健康女性VEGF的阳性率最高为100%，HCG组的VEGF阳性率为85.7%，观察组患者的VEGF阳性率最低为50.0%，结果具有统计学差异（P<0.05）。
2.2三组女性激素水平的比较 通过三组激素水平的研究显示，观察组和HCG组间分泌期E2值、P值比较，差异具有统计学意义（P<0.05），说明HCG组分泌期的E2值、P值高于观察组，E2/P值低于观察组，而增生期的各项激素均值差异有统计学意义；对照组的E2值、P值高于观察组，差异有统计学意义。见表1、表2。
表1 三组激素水平的比较（X±S）
表2 三组激素水平的比较（X±S）
①表示为分泌期血中激素值
2.3观察组和对照组VEGF表达与激素的关系 两组VEGF与月经周期第3天FSH、LH、E2、T、PRL和分泌期的E2、P、E2/P值进行Spearmans等级相关分析，结果显示，VEGF与不同时期各项激素值间的相关无统计学意义，提示VEGF表达与激素水平无关，见表3、表4。
表3 两组VEGF表达与激素的相关系数
表4 两组VEGF表达与激素的相关系数
3 讨论
不孕症是临床妇科的疑难疾病之一，近些年该病呈逐年上升趋势，严重影响了女性的健康和生活，给女性带来了一定的痛苦。临床研究不孕症的病因，主要分为几类：①排卵障碍；②输卵管因素；③男性因素；④不明原因；其中不明原因不孕症占所有不孕症的17%。而不明原因不孕症主要从两个方面进行研究分析，一是受精方面，二是胚胎着床方面。现有研究表明，子宮内膜的调控中，月经周期中的VEGF与受体分泌表达增强，这一时期是内膜容受胚胎的着床期，胚胎着床则是建立妊娠的第一步，成功与否依赖于子宫内膜的良好环境[4]。本次研究主要探讨不明原因的不孕症患者子宫内膜VEGF的表达及体内激素的关系，有研究认为，子宫血管生成过程中的血管内皮生长因子（VEGF）具有重要的作用。无论是子宫内膜修复的增值早期还是容受胚胎着床的分泌期，VEGF均有较高的表达。围着床期VEGF增多，可能有助于提高子宫内膜的容受性，以利于胚胎着床和早期绒毛血管的形成。生殖学家为寻找不明原因在有关子宫内膜血管变化、免疫功能及复杂的内膜生化改变与着床之间的关系，做了许多方面的研究，本研究假设两者之间的关系，同时观察到胚胎围着床期，不明原因不孕症的子宫内膜VEGF表达低于正常对照组。这一结果提示VEGF可能与不明原因不孕症发病有关[5-7]。而VEGF与激素的关系，则有大量研究表明VEGF及受体受缺氧、一氧化氮、细胞因子及细胞分化等因素调控，有动物实验和体外子宫内膜培养中发现，雌激素对VEGF和受体存在上调作用，而肌注HCG后，女性分泌期的黄体组织与未注射相比，前者黄体组织中VEGF的显色区域明显增加，可认为HCG同样对VEGF有调控作用。本次研究与文献报道一致。本次研究中结果显示：对照组健康女性VEGF的阳性率最高为100%，观察组患者的VEGF阳性率最低为50.0%，观察组和HCG组间分泌期E2值、P值比较，差异具有统计学意义（P<0.05），说明HCG组分泌期的E2值、P值高于观察组，E2/P值低于观察组，而增生期的各项激素均值差异有统计学意义；观察组和对照组分泌期的E2值、P值相比较，差异具有统计学意义（P<0.05），说明对照组的E2值、P值高于观察组。观察组和对照组两组VEGF与月经周期第3天FSH、LH、E2、T、PRL和分泌期的E2、P、E2/P值进行Spearmans等级相关分析，结果显示，VEGF与不同时期各项激素值间的相关无统计学意义，提示VEGF表达与激素水平无关。综上所述，不明原因不孕症的原因可能与VEGF有关，分泌期雌、孕激素水平较低可能是不孕的病因，而临床应用HCG治疗可提高机体VEGF的阳性率。
参考文献：
[1]付志红，朱文杰，刘锦，周永红，等口服避孕药对高FSH不孕症患者子宫内膜容受性的影响[J].中国计划生育学杂志，2013，21（4）：69.
[2]孙兆贵，高敏芝，赵晓明，等.卵泡液和血清EG-VEGF、VEGF和TGF-β1水平与IVF妇女卵巢反应的关系及其对妊娠结局的预测价值[J].上海交通大学学报（医学版），2013，33（2）：12.
[3]马楠，范蕊.子宫内膜异位症患者血清中VEGF和IGF-I的表达及其相关性[J].中国妇幼保健，2012，27（21）：75-76.
[4]田喜凤，王振荣.卵泡液中VEGF水平对体外受精-胚胎移植临床结局的影响[J].现代检验医学杂志，2012，27（6）：107-108.
[5]耿玉敏，王燕，刘惠敏，等.不孕症女性血清抗精子抗体、抗子宫内膜抗体及抗苗勒管激素的改变[J].中国综合临床，2012，28（11）：145-147.
[6]陆国健，胡丽梅.女性不孕症患者的激素指标特征与临床诊断价值分析[J].检验医学与临床，2014，30（15）：45-46.
[7]肖琪，曹炎.经阴道超声监测药物治疗不孕症的临床价值[J].中国医药指南，2013，12（17）：107-108.