【摘 要】
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目的 构建结核分枝杆菌外排泵蛋白MmpL6（Rv1557）表达载体,在大肠杆菌E.coli中诱导MmpL6蛋白高表达并进行纯化。方法 以结核分枝杆菌H37Rv菌株基因组DNA为模板,采用聚合酶链反应
【机 构】
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安徽医科大学附属省立医院检验科,安徽医科大学生命科学学院生物学教研室
【基金项目】
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安徽省自然科学基金（编号：1608085QH177）
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目的 构建结核分枝杆菌外排泵蛋白MmpL6（Rv1557）表达载体,在大肠杆菌E.coli中诱导MmpL6蛋白高表达并进行纯化。方法 以结核分枝杆菌H37Rv菌株基因组DNA为模板,采用聚合酶链反应扩增目的基因片段,构建pET21b-MmpL6表达载体。将表达载体转化至大肠杆菌中,加入异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）诱导重组蛋白表达,并针对不同表达菌株、温度进行优化,获取最优表达条件。采用Ni-NTA亲和层析以及凝胶过滤色谱纯化目标蛋白。结果 成功构建pET21b-MmpL6重组表达质粒,经I
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