MAGE-A4重组蛋白的原核表达与纯化

来源 :解放军预防医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wanqadscb

【摘要】

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目的构建MAGE-A4的原核表达质粒并表达纯化相应蛋白,为恶性肿瘤的早期诊断和基因治疗疫苗的研制奠定基础。方法根据目的基因序列合成目的基因并与原核表达载体连接,以构建原

【作者】

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雕丽琼薛莹石梅柴广金穆允凤王丽梅

【机构】

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第四军医大学西京医院放疗科,第四军医大学基础部微生物教研室

【出处】

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解放军预防医学杂志

【发表日期】

：

2013年2期

【关键词】

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肿瘤睾丸抗原 MAGE-A4 原核表达纯化 cancer testis antigen （CTA） melanoma antigen-A4 （MAGE-A

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目的构建MAGE-A4的原核表达质粒并表达纯化相应蛋白,为恶性肿瘤的早期诊断和基因治疗疫苗的研制奠定基础。方法根据目的基因序列合成目的基因并与原核表达载体连接,以构建原核表达质粒pET30a（＋）/MAGE-A4,将酶切鉴定及测序正确的重组质粒转入E.coli BL21,经IPTG诱导表达并行可溶性分析,Western Blot鉴定重组蛋白特异性后,通过亲和层析法纯化重组蛋白。结果成功构建pET30a（＋）/MAGE-A4原核表达质粒,诱导表达得到重组蛋白MAGE-A4,主要以可溶性形式表达,纯化后获得纯

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