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采用硫酸二乙酯（ＤＥＳ）在不同温度下对柱花草愈伤组织进行化学诱变处理，并结合添加有不同浓度Ｌ-羟脯氨酸的培养基进行离体筛选，将经两步法筛选后存活的愈伤组织诱导成小苗，采用１℃下光照培养８ｄ对小苗进行低温筛选，根据寒害程度将小苗分为４个等级。随机选取寒害程度最低的（一级伤害）小苗２ 株，分别切取其一部分茎段为外植体进行愈伤的诱导，其愈伤组织作为测定抗寒生理指标的材料。结果表明，ＤＥＳ的浓度与愈伤组织的存活率呈负相关，处理的温度与愈伤组织的存活率亦呈负相关，０．４％ＤＥＳ（１０℃，２ｈ）处理的愈伤组织经两步筛