【摘 要】
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目的 研究熊果酸通过外泌体介导微小核糖核酸-155-5p（micro ribonucleic acid-155-5p,miR-155-5p）对脓毒症大鼠心肌的保护作用。方法 从60只SD雄鼠中随机挑出50只为建模大鼠，通过腹腔注射内毒素（lipopolysaccharide,LPS）法建立脓毒症大鼠模型。余下10只为正常对照组。将建模成功大鼠随机分为5组，熊果酸高、中、低剂量组、GW4869组、模
【基金项目】
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河南省教育厅高等学校重点科研项目（20A320086）：外泌体介导PLB基因siRNA对脓毒症大鼠心肌的保护作用及其机制，负责人：李江； 河南省科学技术厅重点研发与推广专项（202102310088）：心脏归巢肽修饰的外泌体装载siRNA调控Ca2+/AMPK/mTOR自噬通路对脓毒症心肌损伤的影响，负责人：李江；
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目的 研究熊果酸通过外泌体介导微小核糖核酸-155-5p（micro ribonucleic acid-155-5p,miR-155-5p）对脓毒症大鼠心肌的保护作用。方法 从60只SD雄鼠中随机挑出50只为建模大鼠，通过腹腔注射内毒素（lipopolysaccharide,LPS）法建立脓毒症大鼠模型。余下10只为正常对照组。将建模成功大鼠随机分为5组，熊果酸高、中、低剂量组、GW4869组、模型组。熊果酸高、中、低剂量组腹腔注射5 mg/kg LPS+50%二甲基亚砜（dimethylsurfoxide,DMSO）后立即尾静脉注射熊果酸120、80、40 mg/kg+50%DMSO混合液；GW4869组腹腔注射5 mg/kg LPS+50%DMSO后立即尾静脉注射鞘磷脂酶抑制剂GW4869 2.5μg/g+50%DMSO混合液；模型组大鼠腹腔注射5 mg/kg LPS+50%DMSO后，尾静脉注射等体积生理盐水；正常对照组仅腹腔注射等体积生理盐水后，尾静脉注射等体积生理盐水。另将各组外泌体与原代培养乳鼠心肌细胞共培养，设置未加外泌体仅加入等体积PBS的心肌细胞为PBS对照组；通过脂质体转染技术将miR-155-5p minic转染至大鼠心肌细胞，将转染miR-155-5p心肌细胞与动物实验中各组外泌体共培养24 h，另设置未转染miR-155-5p minic且不加外泌体仅加入等体积PBS的心肌细胞为PBS对照组，仅转染miR-155-5p minic且不加外泌体的心肌细胞为miRNA-155-5p minic转染组和GW4869+熊果酸+miR-155-5p minic组（其中熊果酸分别设置低、中、高剂量）。结果 模型组和GW4869组大鼠心肌细胞出现明显空泡样变、核肿胀，组织水肿明显，可见明显炎性浸润，熊果酸3剂量组大鼠心肌组织病变均出现好转；各组均从外周血中分离出外泌体；模型组和熊果酸3剂量组外泌体中miR155-5p表达水平均高于正常对照组（P＜0.05）,GW4869组外泌体中miR155-5p表达水平低于正常对照组（P＜0.05）；经培养鉴定证实所取细胞为乳鼠心肌细胞；模型组、GW4869组、熊果酸3剂量组白介素1β（interleukin-1β,IL-1β）、白介素6（interleukin-6,IL-6）水平均高于磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline,PBS）对照组和正常对照组（P＜0.05），熊果酸3剂量组上述指标水平均低于模型组和GW4869组（P＜0.05）;miR-155-5p minic转染乳鼠心肌细胞后miR-155-5p minic转染组细胞中miR-155-5p表达水平升高（P＜0.05）。将各组外泌体与miR-155-5p minic转染后细胞共孵育，GW4869组细胞培养基中IL-1β、IL-6浓度均高于其余各组（P＜0.05），模型组+miR-155-5p minic均高于miR-155-5p minic转染组（P＜0.05）,GW4869+熊果酸高剂量+miR-155-5p minic组与miR-155-5p minic转染组差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 熊果酸可改善脓毒症大鼠心肌病变，且可通过抑制外泌体中miR-155-5p表达水平，抑制心肌细胞炎症反应。
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