严重眼表疾病的治疗常因角膜或结膜上皮化延迟而变得复杂.上皮化延迟(PED)的治疗涉及导致PED的各种因素,包括异常眼睑重建、人工泪液、自体血清点眼和近期提倡的作为受损基底膜替代物的羊膜之应用.关于羊膜的报道多数集中于羊膜作为基底膜替代物,被认为是促进上皮生长的理想底物.此研究不同于以往的报道,即羊膜被用作遮盖再生上皮的暂时性植片,不包括其基底膜特性. 临床研究:患者20例20眼,分为两组,一组是PED患者接受羊膜移植,仅保守疗法治疗2周无效的患者方可进入此研究;另一组是行角膜缘干细胞移植术的患者,作为预防性措施接受这一疗法,因为此类患者角膜上皮化常很困难.疑有活动性炎症者除外,按常规方法施行羊膜移植,所有病例均为基底膜面向外,术后1周取下羊膜植片,行组织病理学检查,包括苏木素-伊红染色,及TUNEL染色.浸润细胞应用免疫细胞化学方法检测,用抗CD14,CD4,CD8和CD20单克隆抗体特征性标记受累细胞是T细胞或B细胞亚群. 体外研究:几种T细胞来源细胞系(Raji,Molt 4)和由Ficoll密度梯度离心分离出来的外周血单核细胞分别与保存的人羊膜共同培养,获取含有淋巴细胞的羊膜.每组事先用β1及β2整合蛋白的封闭抗体处理.羊膜行苏木素-伊红染色及TUNEL技术染色. 从临床研究获取的羊膜,其基质中大多有不同程度的淋巴细胞浸润,CD14染色阳性表明大多数属于单核细胞/巨噬细胞系.CD4、CD8阳性细胞所占比例几乎相等,说明两种类型T细胞均存在.另一方面,CD20抗体着染不明显,证明B细胞浸润很少.大多数浸润的淋巴细胞TUNEL(+),提示迁移到羊膜时多已凋亡.其凋亡过程是否是由羊膜所导致的主动效应还不很清楚,因为淋巴细胞在羊膜中可能仅进行了一次生理性凋亡过程.所有的组织学标本均表明浸润细胞没有侵犯基底膜,大多数细胞似乎都与紧邻于羊膜下的眼表面相隔开来.另有可能是羊膜作为一种生理性屏障,就像接触镜保护眼表那样,以防泪膜中的炎症细胞侵入.此研究中作者没有比较羊膜处于相反方向,即基质面向上时的结果. 体外研究结果发现Raji和外周血单核细胞都没有侵入羊膜,而Molt4粘附并浸润于羊膜基质中.这表明淋巴细胞的粘附和浸润是有选择性的,提示其粘附是通过有关的特定分子进行的.Molt4的粘附未被加入的主要粘附分子β1和β2整合素阻遏剂所阻断,提示其它分子可能参与此过程. 此研究表明羊膜在眼表作为暂时性植片能够促进眼表上皮化,羊膜使浸润于其中的淋巴细胞与眼表面相隔离,似乎在羊膜的抗感染机制中发挥一定作用,连同羊膜其它已公认的特性使羊膜在严重的眼表疾病治疗中成为一种有用的外科材料.