解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生模型大鼠p16、PTEN基因的去甲基化和蛋白诱导表达

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目的:观察解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生模型大鼠细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(cyclin-dependent kinase inhibitor 2A,p16)、磷酸酶张力蛋白同源蛋白(phosphatase and tensin homolog,PTEN)基因甲基化状态和蛋白表达的影响,并探讨解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生的治疗作用.方法:采用低浓度N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N’-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)的综合造模方法,创建实验性大鼠胃黏膜异型增生病变模型;分模型对照组、西药维甲酸治疗组、解毒化瘀健脾方治疗组,并选择正常大鼠作为阳性对照组进行干预;应用甲基化特异PCR技术检测大鼠胃黏膜p16、P T E N基因甲基化状态;R e a l-t i m e P C R、Western blot、免疫组织化学技术检测p16,PTEN在mRNA和蛋白表达水平的变化.结果:模型组胃黏膜异型增生细胞p16、PTEN基因的甲基化阳性检出率均为33.33%(6/18),均高于正常对照组20%(2/10),但差异不显著;解毒化瘀健脾方治疗组p16基因甲基化检出率均未0%(0/15),相比模型组20%(2/10)甲基化程度降低,但差异均无统计学意义;p16在mRNA(P<0.001)和蛋白(P<0.01)水平的表达相比模型组极显著升高;PTEN在mRNA(P<0.05)和蛋白(P<0.01)水平的表达相比模型组极显著升高.结论:解毒化瘀健脾方对异型增生胃黏膜细胞p16、PTEN基因具有一定的去甲基化作用,并显著诱导二者的表达量增加.解毒化瘀健脾组方的对胃黏膜异型增生具有潜在的治疗作用.
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