eEF1A1基因克隆、原核分泌表达及融合蛋白纯化

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eEF1A1作为蛋白合成中的重要翻译延伸因子,可与多种功能性蛋白如F—actin、BPOZ-2结合。并在细胞凋亡、蛋白降解方面起重要作用。以往原核基因工程蛋白表达系统大多为包涵体表达的变性分子,需要复性。为了获得eEF1A1原核分泌性可溶性蛋白分子,克隆了人eEF1A1蛋白编码序列(约1300bp),并成功构建pET22b—A原核分泌表达重组质粒.转化到大肠杆菌B121(DE3)菌株,0.4mmol/L终浓度IPTG诱导,经不同温度下包涵体与胞浆蛋白组分分析,快速明确蛋白表达情况,即诱导4h后,37%表达
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