目的 建立EpCAM抗体偶联纳米磁珠阳性分离上皮来源的实体瘤外周血CTC的方法(简称"磁珠分离法"),探讨该方法分离CTC的灵敏度和应用意义.方法 用7.5 ml健康志愿者外周血裂解红细胞分别倍比稀释加入5、10、20、50、100个乳腺癌细胞系MCF7、食管癌细胞系KYSE70、胰腺癌细胞系BxPC-3及胃癌细胞系9811P,通过磁珠分离法富集癌细胞,荧光显微镜下检测体外加入癌细胞的回收率.然后,用磁珠分离法富集未治疗的30例食管癌(Ⅰ期+Ⅱ期6例、Ⅲ期+Ⅳ期24例)、35例乳腺癌(Ⅰ期+Ⅱ期15例、Ⅲ期+Ⅳ期20例)、30例胰腺癌(Ⅰ期+Ⅱ期5例、Ⅲ期+Ⅳ期25例)、33例胃癌患者(Ⅰ期+Ⅱ期13例、Ⅲ期+Ⅳ期20例)和30例慢性胃炎及30名健康志愿者的CTC,同时结合IF和HE染色鉴定各组的CTC.另外,用FISH分别检测分析食管癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌患者200个CTC中8号和20号染色体拷贝数水平.结果 用4,6-二眯-2苯吲哚(DAPI)染色食管癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌等4种癌细胞系并加入健康志愿者7.5 ml外周血的组内试验中,荧光显微镜下计数4种癌细胞的组内的平均回收率分别为87%、87%、86%和88%;5种稀释梯度的细胞数在4种癌细胞系的组间的平均回收率分别是88%、85%、87%、88%和87%.在107的外周血白细胞中能富集到1个癌细胞.采用磁珠分离法从食管癌、乳腺癌、胰腺癌及胃癌患者中检出≥2个CTC的阳性率分别为50%(15/30)、63%(22/35)、70%(21/30)及61%(20/33),健康志愿者和炎症患者均未检出CTC.食管癌、乳腺癌、胰腺癌组分别与健康对照组和炎症组比较,经精确概率法分析,差异均有统计学意义(P值均为0.000).80%的食道癌、75%的乳腺癌、65%的胰腺癌和59%的胃癌患者CTC中均发生8号和20号染色体非整倍体改变.结论 建立的磁珠分离法对富集分离实体瘤外周血CTC具有较好的分选灵敏度和准确性.食道癌、乳腺癌、胰腺癌和胃癌患者中的CTC多发生8号和20号染色体非整倍体改变。