【摘 要】
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为了检测环境中潜在的LXRα效应物质.本研究以LXRα蛋白为例,利用核受体蛋白与小分子亲和结合的原理,构建了pCold-TF-LXRα重组蛋白并优化了重组蛋白的表达条件,建立了特异性
【机 构】
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重庆大学三峡库区生态环境教育部重点实验室,北京大学城市与环境学院
【基金项目】
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政府间国际科技创新合作重点专项(2016YFE0117800),国家自然科学基金资助项目(21976021),国家重点研发计划(2019YFD1100504)
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为了检测环境中潜在的LXRα效应物质.本研究以LXRα蛋白为例,利用核受体蛋白与小分子亲和结合的原理,构建了pCold-TF-LXRα重组蛋白并优化了重组蛋白的表达条件,建立了特异性捕获活性物质的方法.结果表明:诱导温度为20℃、诱导剂IPTG浓度为0.4mmol/L为重组蛋白的最佳表达条件;同时,利用LXRα激动剂T0901317 4个梯度浓度(0.25,2.5,25,250μg/L)的加标回收率实验测得线性回归曲线为y=0.83604x+0.40763,R^2=0.9948,证明方法具有有效性;对比p
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