植物乳杆菌p-8转化亚油酸为共轭亚油酸的研究

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cis9, trans11-Conjugated linoleic acid(c9, t11-CLA)、trans10, cis12-Conjugated linoleic acid(t10, c12-CLA)和trans9, trans11-Conjugated linoleic acid(t9, t11-CLA)是三种主要发挥益生功能的异构体,可由生物转化亚油酸(Linoleic acid,LA)而来。本文研究了植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,L. plantarum)p-8的菌体、菌体破碎液和重组亚油酸异构酶系转化LA为CLA的能力和机制。结果表明:L. plantarum p-8在含有LA的MRS上清液和菌体破碎液体外催化LA时,都可以低效产生c9, t11-CLA、t10, c12-CLA和t9, t11-CLA,但菌体中只有很少的t10, c12-CLA。RT-qPCR结果表明,亚油酸异构酶系的表达水平较低可能是CLA产量较低的原因。独立表达的重组亚油酸异构酶系成员、黄素腺嘌呤二核苷酸(Flavin denine dinucleotide,FAD)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+)都存在才可完成LA转化为c9, t11-CLA、t10, c12-CLA和t9, t11-CLA,转化途径与L. plantarum AUK1009一致。L. plantarum p-8的亚油酸水合酶经同源建模后有三个结构域,底物结合位点与FAD位点位于三个结构域连接处的疏水空腔中,M76和Y180是2个必需基团。
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