甘草次酸下调Bloom综合征解旋酶的表达及PC3细胞的增殖凋亡和侵袭迁移

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目的在甘草次酸处理前列腺癌细胞(PC3细胞)的基础上,检测细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡及Bloom综合征(BLM)解旋酶和细胞凋亡因子Caspase-3的表达。方法通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)、Transwell小室、划痕法检和Hoechst/PI双染分别检测细胞的增殖能力、侵袭能力、迁移能力和凋亡率;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western-blot分别检测检测BLM和Caspase-3基因的转录和蛋白表达。结果 MTT法表明,甘草次酸浓度在0.12 mol·L-1以下时,对细胞的增殖能力没有影响,大于0.12 mol·L-1时,随着药物浓度的增大,细胞的增殖能力逐渐下降;侵袭和划痕表明,甘草次酸浓度在0.16 mol·L-1以上时,细胞的侵袭和迁移能力均显著减小;Hoechst/PI双染显示,甘草次酸浓度在0.12 mol·L-1以上时,细胞发生明显的凋亡;荧光定量PCR表明,甘草次酸浓度在0.12 mol·L-1以上时,随着浓度的增大,PC3细胞中的BLM基因的mRNA的表达量逐渐下降,而Caspase-3基因的表达量逐渐上升;Western blot表明,甘草次酸浓度在0.12 mol·L-1时,BLM解旋酶的表达量明显降低,而Caspase-3蛋白的表达量明显升高。结论甘草次酸抑制PC3细胞的增殖、侵袭和迁移与BLM解旋酶的低表达有关,而甘草次酸促进PC3细胞发生凋亡与细胞凋亡因子Caspase-3高表达有关。
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