具有AAV载体包装功能的重组HSV的产生

来源 :科学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jxj860205
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
腺病毒伴随病毒(AAV)载体有望成为理想的基因治疗载体.常规的共转染法难以大规模制备重组AAV(rAAV),本研究产生了一种具有rAAV包装功能的重组单纯疱疹病毒(rHSV),为rAAV的大规模制备提供了新的思路.采用一套含有1型单纯疱疹病毒(HSV-1)全基因组的粘粒系统(Davison AJ et al, 1993),该系统含有5个粘粒,依次称为cos48, cos28, cos6, cos14和cos56.将AAV的rep和cap基因克隆到粘粒cos6的HSV-1 UL-2基因的XbaⅠ位点上,构建成cos6-rcΔUL2.将cos6-rcΔUL2与其他4个粘粒经PacⅠ酶切后共转染BHK-21细胞,5个粘粒在细胞内发生同源重组而产生携带rep和cap基因的病毒HSV1-rc/ΔUL2.实验结果表明,该重组病毒可稳定传代,并能将瞬时或稳定存在于细胞中的rAAV载体包装成具有感染能力的rAAV.该病毒经改进后,有望以感染载体细胞系的方式实现rAAV的大量生产.
其他文献
以性成熟公猪睾丸和外周血为材料,采用长低渗、高氯仿卡诺固定液固定和外周血细胞培养制备减数分裂粗线期二价体和有丝分裂中期染色体,通过对二价体和有丝分裂中期染色体分裂
遍在蛋白(ubiquitin)是由76个氨基酸残基组成的一种高度保守的蛋白质,通常以单体或与其它蛋白质结合的形式广泛存在于真核生物细胞中。遍在蛋白分为UbEP(u-biquitinextensionprotein)和polyubiquitin两类,分... Ubiquitin is a highly con
Pheophorbide a(PPa)--叶绿素a的一种分解产物,是一种光敏剂. 用自旋捕捉和消自旋等ESR技术及激光光解技术研究了PPa在PBS和DPPC脂质体介质中光敏反应的Ⅰ型和Ⅱ型机制. 通过
构建了含有RubisCO Form II基因的可转化大肠杆菌-紫色非硫杆菌穿梭质粒(PMPB-2),将其转化紫色非硫杆菌野生型Rhodopseudomonas palustris No.7和紫色非硫杆菌RubisCO Form I
利用脉冲辐解技术研究了从民间中药中提取的一种苯丙素甙:角胡麻甙C和3种素似物:红景天甙、6-氧-阿魏酰葡萄糖、6-氧-对羟基桂皮酰葡萄糖与羟自由基的反应,测得反应速率常数
1996年1月至7月在14例高危患者中,采用不使用体外循环的左胸微创径路完成冠状动脉搭桥手术.患者的高危情况包括左室功能不全,充血性心力衰竭,年龄70岁以上,慢性肾功能衰竭,中
通过控制产酶过程pH值能有效提高里氏木霉木聚糖酶活力.结果表明,当控制产酶pH为4.0时,有利于提高木聚糖酶活力,且此pH对提高β-木糖苷酶活力的影响更大.pH调控时间不宜过长,
天花粉是一种有着悠久应用历史的引产中药,其有效成分天花粉蛋白最近被证明是一种核糖体抑制蛋白,它通过切除28S rRNA的A4324的1个腺嘌呤使核糖体失活而杀伤细胞.但是,天花粉
研究了丹参冠瘿组织悬浮培养过程的培养特性及细胞的生长和丹参酮的合成规律,并建立了丹参冠瘿组织生长、底物消耗和产物积累的分相动力学模型,模型计算结果与实验值吻合较好
光镜下,用组织学和组织化学的方法对四个不同年龄段扬子鳄不同肠段进行了研究.扬子鳄肠道长度随年龄增大而增加,相对长度从初生至8月龄逐减,从8月龄至2龄增大.肠道各项组织学