农杆菌介导佛手遗传转化主要影响因素的研究

来源 :热带亚热带植物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:vgbin2
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采用根癌农杆菌介导的佛手叶盘转化法,在建立转海藻糖合酶基因(TPS)佛手体系过程中,对影响农杆菌转化频率的各种因素进行了研究.结果表明,佛手叶盘需在黑暗条件下MT培养基上预培养2-3 d,与农杆菌共培养3 d较合适;农杆菌菌液浓度OD600约为0.6-0.8,感染时间20 min;抑制农杆菌生长的抗生素浓度以头孢霉素(Cef)250 mgL^-1和羧苄青霉素(Cb)250 mgL^-1且延迟筛选时间4 d最好;共培养基中添加100μmol/L乙酰丁香酮(AS)和400mg L^-1半胱氨酸(L-Cys)对
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