微波治疗后坏死肿瘤组织致敏的树突状细胞介导肿瘤免疫治疗

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目的 探讨微波凝固治疗(MCT)后坏死肿瘤组织能否致敏树突状细胞(DC),致敏DC是否具有特异性抗肿瘤作用.方法 对BALB/c小鼠皮下肿瘤结节进行MCT治疗后,取出坏死的组织碎块研磨过滤,滤液与体外培养的小鼠骨髓来源的DC共同孵育获得致敏DC.观察DC的形态并检测其表型.3H-TdR掺入法测定DC刺激T细胞反应性增殖和51Cr释放测定法检测DC诱导特异性CTL的细胞毒作用,以及体内对小鼠皮下肿瘤的抑制情况.最后再检测致敏DC治疗后的荷瘤鼠脾细胞悬液提取的T细胞在体内外的杀伤特异性.结果 与MCT治疗后坏死CT-26肿瘤组织滤液共同培养的DC具有典型的致敏DC形态特征和表型.致敏DC和未致敏DC诱导T细胞增殖强度在不同DC/T比下分别为:DC/T比1∶10时,80±10 vs 10±5;DC/T比1∶20时,58±7 vs 9±4,两两比较差异均有统计学意义(均P<0.01).致敏DC和未致敏DC诱导的CTL在不同E/T比下对CT-26肿瘤细胞杀伤率分别为:E/T比10时,13.6±2.5 vs 1.1±0.4;E/T比20时,27.5±4.4 vs 1.4±0.4;E/T比50时,51.2±8.1 vs 1.4±0.5,两两比较差异均有统计学意义(P<0.01).二者诱导的CTL在不同E/T比下对MIP/ND4淋巴瘤细胞杀伤率分别为:E/T比10时,2.61±0.64 vs 0.87±0.15;E/T比20时,5.22±0.65 vs 2.18±0.41;E/T比50时,6.09±0.83 vs 3.91±0.51,两两比较差异均无统计学意义(均P>0.01).体内实验,皮下移植瘤大小在致敏DC组、未致敏DC组和生理盐水对照组间随小鼠存活时间延长越来越明显,至40 d时3组肿瘤平均重量分别为4.5 g±1.1 g,6.9 g±1.6 g,9.0 g±1.5 g,组间差异有统计学意义(均P<0.01).致敏DC治疗后的荷瘤鼠脾细胞悬液内T细胞在体内外也均显示了对CT-26肿瘤的杀伤作用.结论 作为一种全细胞抗原,MCT治疗后的肿瘤坏死组织能够致敏DC,致敏DC在体内外均具有明显的特异性抗小鼠CT-26肿瘤作用。

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