【摘 要】
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以感染传染性法氏囊病病毒(IBDV)的鸡法氏囊组织制备免疫抗原,免疫BALB/c系小鼠,取其脾细胞与NS0浆细胞进行细胞融合;以AC-ELISA 筛选阳性细胞克隆,经3次有限稀释克隆化及鉴
【机 构】
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河南省农业科学院,畜牧兽医研究所,河南,郑州,450002
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以感染传染性法氏囊病病毒(IBDV)的鸡法氏囊组织制备免疫抗原,免疫BALB/c系小鼠,取其脾细胞与NS0浆细胞进行细胞融合;以AC-ELISA 筛选阳性细胞克隆,经3次有限稀释克隆化及鉴定,获得2株识别IBDV不同抗原决定簇的高亲和力单克隆抗体株.以该2株单克隆抗体制备快速诊断试剂,组装了鸡传染性法氏囊病快速诊断试剂盒.该试剂盒由若干40孔酶标板,1号酶标液(HRP标记IBDV单抗)、2号洗涤液、3号显色液(TMD显色底物)、4号显色液(供氢体)等反应液,0.01mol/L PBS(pH7.2)阴性对照、IBDV阳性对照(提取的IBDV蛋白)组成,并对试剂盒特异性、敏感性、重复性及稳定性等进行了鉴定.应用该快速诊断试剂盒对来源于不同地区的临床诊断疑似IBD的法氏囊病料各20份进行了检测,并与琼扩试验、常规ELISA检测结果作了比较,结果表明,该快速诊断试剂盒的检测结果与常规ELISA的检测结果相似,操作程序简便,可在10～15min内完成,适合于兽医临床推广应用.
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