【摘 要】
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目的:研制5型肺炎链球菌荚膜多糖(PN5PS)与白喉无毒突变体(CRM197)结合疫苗。方法:采用还原胺化法制备结合物,即以肺炎5型多糖的邻位羟基作为活化位点,用高碘酸钠进行氧化,形
【基金项目】
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国家重大新药创制(2015ZX09J15105-002-003);工业发酵微生物教育部重点实验室暨天津市工业微生物重点实验室(天津科技大学)开放基金(2016IM102)
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目的:研制5型肺炎链球菌荚膜多糖(PN5PS)与白喉无毒突变体(CRM197)结合疫苗。方法:采用还原胺化法制备结合物,即以肺炎5型多糖的邻位羟基作为活化位点,用高碘酸钠进行氧化,形成的醛基与CRM197蛋白上的氨基生成席夫碱反应,在氰基硼氢化钠的作用下形成共价结合物,并将制备的结合物与两种不同铝佐剂吸附,用间接ELISA法检测大鼠血清中针对肺炎5型多糖的抗体效价,比较结合疫苗与不同佐剂吸附前后的免疫原性。结果:当多糖活化度为7. 3时,总糖及蛋白的回收率较高,游离糖含量较低,糖蛋白结合比在1. 2~2.7时结合疫苗具有较强的免疫原性,结合比为1. 9时结合疫苗的免疫原性最强;结合物吸附磷酸铝佐剂后所产生的抗体水平略高于氢氧化铝。结论:通过还原胺化法制备的PN5PSCRM197结合疫苗具有较好的免疫原性。
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