菠菜硝酸还原酶基因的克隆与原核表达

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利用RT—PCR技术从低富集硝酸盐的菠菜品种中克隆得到硝酸还原酶(NR)基因,并进行了同源性分析;构建该基因的原核表达载体pET—NR,转入大肠埃希菌BL21(DE3)中,用IPTG进行诱导表达,为深入研究并揭示菠菜的硝酸盐富集机制奠定了基础。结果表明:获得的NR基因包含完整的开放阅读框(2781bp),编码926个氨基酸,与菠菜、甜菜NR核苷酸序列的同源性分别为99%、80%,与其氨基酸序列的相同性分别为99%、86%。SDS—PAGE电泳显示重组菌经IPTG诱导表达出104ku左右的蛋白质,与预期大小
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