【摘 要】
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目的 探讨miR-15b靶向LPAR3调控食管癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法 取对数生长期的人食管癌Eca109细胞分为对照组、miR-15b mimic组、miR-NC组、miR-15b mimic+pcDNA3.1组、miR-15b mimic+pcDNA-LPAR3组；另设对数期生长的人食管上皮细胞HEEpiC为空白组。采用qRT-PCR检测各组细胞中miR-15b和LPAR3 mRNA
【机 构】
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青海卫生职业技术学院临床医学系外科教研室
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目的 探讨miR-15b靶向LPAR3调控食管癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法 取对数生长期的人食管癌Eca109细胞分为对照组、miR-15b mimic组、miR-NC组、miR-15b mimic+pcDNA3.1组、miR-15b mimic+pcDNA-LPAR3组；另设对数期生长的人食管上皮细胞HEEpiC为空白组。采用qRT-PCR检测各组细胞中miR-15b和LPAR3 mRNA的表达；应用MTT法、划痕实验和Transwell小室实验分别检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭情况；Western blot检测Eca109细胞中LPAR3和增殖、迁移、侵袭相关蛋白（Cyclin D1、MMP-2、MMP-9）的表达。结果 与空白组相比，对照组Eca109细胞中miR-15b水平明显降低（1.00±0 vs 0.42±0.03,t=33.486,P＜0.01）,LPAR3 mRNA水平显著升高（1.00±0 vs 2.33±0.15,t=15.358,P＜0.01）;与对照组相比，miR-15b mimic组细胞miR-15b水平显著升高（0.42±0.03 vs 4.61±0.38,t=19.039,P＜0.01）,LPAR3 mRNA（2.33±0.15 vs 1.29±0.13）和蛋白（1.12±0.13 vs 0.35±0.03）水平、细胞增殖率（100.00±0 vs 64.57±6.11）、划痕愈合率（63.45±7.20 vs 36.52±4.29）、Eca109细胞进入Transwell小室下层的数量（155.31±14.23 vs 101.33±11.45）、Cyclin D1（0.85±0.10 vs 0.38±0.05）、MMP-2（0.76±0.08 vs 0.33±0.04）、MMP-9（0.94±0.10 vs 0.41±0.05）蛋白表达均显著降低（t=9.075、9.996、10.044、5.565、5.119、7.281、8.327、8.211,P＜0.01）;使用pcDNA-LPAR3过表达LPAR3能明显逆转miR-15b mimic对细胞增殖、迁移和侵袭的抑制能力。结论 食管癌中过表达miR-15b可能通过下调LPAR3表达，抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭。
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