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通过特定的引物，以土壤宏基因组DNA为模板，采用PCR技术扩增获得3．3kb的DNA片段，该片段连接于pSE380载体构建重组质粒pSE380-dhaB12用于测序和表达。序列分析表明，该DNA片段编码的氨基酸序列与已报导的丁酸梭菌不依赖辅酶B12甘油脱水酶的相似性达99％。通过IPTG诱导，dhaB12基因在大肠杆菌中表达成功，SDS—PAGE分析表明有88kD和34kD两条蛋白质条带，在没有辅酶B12存在的情况下，所表达的酶具有明显的甘油脱水酶活性。