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目的：通过VITEKMS微生物检测系统对养殖场及市售活鸡来源的空肠弯曲菌和单核细胞性李斯特菌进行激光解析飞行质谱鉴定，建立两种致病菌的质谱鉴定方法。方法：从样品中分离获得疑似的空肠弯曲菌和单核细胞性李斯特菌，经不同配比的基质液处理后进行质谱鉴定。通过分析检出菌特征峰及相对丰度差异来评价不同配比基质液对两种致病菌检测的影响。结果：空肠弯曲菌和李斯特菌对基质液配比要求具有明显差异，前者不需要经过甲酸裂解，而对三氟乙酸含量敏感，后者鉴定结果受到甲酸裂解制约。基质液含水量控制在体积分数30%可以有效避免特征峰缺失