一步法扩增IBDV上海株全长基因组cDNA

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kuangtuzhm11
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为了研究鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)上海株的全部核苷酸序列,应用蛋白酶K消化、割胶纯化获得了高纯度的dsRNA,应用随机引物合成了cDNA的第一链.参照基因库中相关IBDV毒株的基因序列,设计合成了两对引物,一步扩增出IBDV上海株全长基因组cDNA的A片段和B片段.为了验证获得的A片段和B片段的正确性,以扩增出的A片段为模板,成功扩增出IBDV的VP2基因,并应用T载体进行了克隆和测序,测序结果显示,其与国内外数株IBDV毒株的同源性很高,表明本文建立的扩增IBDV全长基因组cDNA的一步法正确、可
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