黄瓜霜霉菌ITS区序列分析反应体系的构建及优化

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文章以黄瓜霜霉菌为材料,采用改良的CTAB方法提取基因组DNA,研究了黄瓜霜霉菌ITS区序列分析中PCR反应体系的各主要成分对检测结果的影响,确立了适宜的退火温度和反应体系。优化后的反应体系(25μL)为:采用引物ITS1/ITS4各40ng,60ng DNA模板,2.5mmol·L^-1 Mg^2+ 2.0μL,2.5mmol·L^-1 dNTP 1.5μL,Tap酶1U。优化的PCR扩增程序为:94℃预变性3min,94℃ 50s,52.2℃ 40s,72℃ 1.5min。在这一条
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