【摘 要】
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目的：探讨二氢嘧啶脱氢酶基因（DPYD）T85C位点突变对乳腺癌细胞5-氟尿嘧啶（5-FU）敏感性的影响。方法：从肝脏组织中提取mRNA,扩增得到野生型DPYD编码序列。利用定点突变技术,获得T85C
【机 构】
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天津医科大学肿瘤医院肿瘤研究所,天津医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学系
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目的：探讨二氢嘧啶脱氢酶基因（DPYD）T85C位点突变对乳腺癌细胞5-氟尿嘧啶（5-FU）敏感性的影响。方法：从肝脏组织中提取mRNA,扩增得到野生型DPYD编码序列。利用定点突变技术,获得T85C定点突变的DPYD编码序列。将GFP、野生型和突变型DPYD序列,连入PCDH-CMV-MCS-EF1-Puro载体。转染上述3种质粒到MDA-MB-231细胞中,获得稳定表达的细胞株。MTT法检测不同浓度5-FU（0、1、5、10、50μg/mL）处理24 h后,细胞存活情况。结果：酶切验证3种重组质粒,观
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