猪δ冠状病毒N蛋白的原核表达和间接ELISA检测方法的建立

来源 :西北农林科技大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:tangzai521
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[目的]制备猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)N蛋白及其多克隆抗体,建立检测PD-CoV N蛋白抗体的间接ELISA方法.[方法]从PDCoV CH-01毒株中扩增N全基因,克隆至原核表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-PDCoV-N,转入BL21(DE3),用IPTG诱导表达重组N蛋白,并对该蛋白的反应原性进行鉴定.诱导表达的N蛋白经镍柱纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.同时用镍柱纯化后的N蛋白作为包被抗原,建立PDCoV的间接ELIS
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