论文部分内容阅读
目的 建立丙型肝炎病毒(HCV)转基因小鼠模型,探讨丙型肝炎发病机制,研究HCV结构蛋白编码基因的功能与致病作用.方法采用长片段聚合酶链反应技术扩增HCV结构基因,构建稳定表达与诱导表达两种真核细胞表达重组体,经体外细胞转染后,将具有表达功能的线性化表达元件采用显微注射法,直接导入1736枚小鼠受精卵,先后移入69只假孕母鼠输卵管.结果妊娠受体25只,产仔105只,成活57只.注射卵成仔率仅3.28%.经聚合酶链反应扩增、测序、酶切及Southern杂交鉴定,获阳性首建鼠26只,注射卵首建鼠成功率仅1.50%.其中稳定表达型10只,诱导表达型1 6只.经与正常鼠交配,获F1阳性杂合鼠分别38只、20只.一个纯合子品系.结论研究建立了稳定表达与诱导表达两类HCV结构基因转基因小鼠,为进一步研究HCV致病机制,H C V基因功能奠定了基础。