【摘 要】
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在哺乳动物细胞系中转基因的效率相对较高而在鱼类细胞系中相对较低, 为了获得鱼类高效转基因细胞系, 我们从模式鱼类青鳉(Oryzias latipes)中分离和构建了肌肉细胞系OLM.该
【机 构】
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华中农业大学水产学院,农业部淡水生物繁育实验室,武汉 430070华中农业大学水产学院,农业部淡水生物繁育实验室,武汉 430070;水产高效健康生产湖南省协同创新中心, 常德 415000;湖北省水
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在哺乳动物细胞系中转基因的效率相对较高而在鱼类细胞系中相对较低, 为了获得鱼类高效转基因细胞系, 我们从模式鱼类青鳉(Oryzias latipes)中分离和构建了肌肉细胞系OLM.该细胞系类似于纤维细胞, 在 28℃ DMEM和10％的胚胎牛血清中培养了超过88代.通过染色体分析, 它属于两倍体并含有48条染色体.在脂质体介导下, 报告基因的转染效率可以达到40％, 在测试的其他鱼类细胞中转染效率最高.此外还构建了稳定转染转基因或者非编码RNA的细胞系.OLM细胞对常见的病毒SVCV、GCRV、SGIV等不敏感.综上所述, 研究在青鳉中建立了一种能高效转染的肌肉细胞系, 它适用于鱼类瞬时和稳定的转基因研究.
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