番鸭呼肠孤病毒σC编码基因在sf-9昆虫细胞中的表达

来源 :中国兽医科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：didierda

【摘要】

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采用RT—PCR方法扩增了番鸭呼肠孤病毒S14株σC蛋白编码基因，将其克隆到pFastBacHTA载体上，经酶切鉴定及测序，筛选出阳性重组载体pFastBacHTA-σC；将pFastBacHTA-σC转化到DH10Ba

【作者】

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郭东春耿宏伟刘明刘霓红张云

【机构】

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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,东北农业大学生命科学院

【出处】

：

中国兽医科学

【发表日期】

：

2007年5期

【关键词】

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番鸭呼肠孤病毒 σC 杆状病毒表达 Muscovy duck reovirus σC baculovirus expression

【基金项目】

：

国家重点基础研究发展规划（973）项目（2005CB522905）

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采用RT—PCR方法扩增了番鸭呼肠孤病毒S14株σC蛋白编码基因，将其克隆到pFastBacHTA载体上，经酶切鉴定及测序，筛选出阳性重组载体pFastBacHTA-σC；将pFastBacHTA-σC转化到DH10Bac感受态细胞中，通过蓝白斑和PCR筛选，获得重组转座子rBacmid-σC。在脂质体介导下将rBacmid-σC转染sf-9昆虫细胞，获得重组杆状病毒rBV-σc；SDS—PAGE和Western—blot分析表明，在sf-9细胞中表达了分子质量约37ku的σC蛋白，该蛋白能与原核表达的σ

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