【摘 要】
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目的:研究mi R-4306在骨肉瘤细胞中的表达及其对骨肉瘤细胞生学行为的影响。方法:选取人成骨细胞h FOB 1.19和骨肉瘤细胞Saos-2、MNNG/HOS CI#5,采用q RT-PCR检测mi R-4306表达水平。将mi R-4306 mimics和阴性对照分别转染至骨肉瘤细胞Saos-2和MNNG/HOS CI#5,采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖,Transwell实验检
【基金项目】
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福建省卫生计生委医学创新课题（2018-CXR-2）；
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目的:研究mi R-4306在骨肉瘤细胞中的表达及其对骨肉瘤细胞生学行为的影响。方法:选取人成骨细胞h FOB 1.19和骨肉瘤细胞Saos-2、MNNG/HOS CI#5,采用q RT-PCR检测mi R-4306表达水平。将mi R-4306 mimics和阴性对照分别转染至骨肉瘤细胞Saos-2和MNNG/HOS CI#5,采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移及侵袭,蛋白质免疫印迹检测细胞内上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）标志蛋白表达水平。通过在线靶基因预测网站Targetscan、Starbase预测mi R-4306靶基因可能为富含AT序列特异性结合蛋白2（special AT-rich sequence-binding protein 2, SATB2）,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。将mi R-4306 mimics、LV-SATB2共转染至骨肉瘤细胞中,检测细胞增殖、迁移、侵袭以及EMT标志蛋白表达水平变化。结果:与人成骨细胞h FOB 1.19比较,骨肉瘤细胞Saos-2、MNNG/HOS CI#5中mi R-4306表达明显降低（P均＜0.01）。转染mi R-4306mimics后,骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭能力下降和N-钙黏蛋白、血管内皮生长因子表达水平显著降低以及E-钙黏蛋白表达水平显著升高（P＜0.05或＜0.01）。SATB2是mi R-4306下游的直接靶标;与mi R-4306 mimics+LV-NC组比较,mi R-4306 mimics+LV-SATB2组部分逆转mi R-4306对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移和EMT的影响。结论:mi R-4306在骨肉瘤细胞中呈低表达,其可通过下调SATB2表达抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭和EMT。
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