【摘 要】
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【目的】探讨在巯乙基磺酸钠(MESNa)与碳酸氢铵(NH4HCO3)存在下,对在大肠杆菌上表达的重组融合蛋白中内含肽(Intein)用硫醇(DTT)进行自剪切,促使抗菌肽(MME)碳末端实现酰胺化
【机 构】
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福建农林大学食品科学学院,福建农林大学动物科学学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（51202030）
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【目的】探讨在巯乙基磺酸钠(MESNa)与碳酸氢铵(NH4HCO3)存在下,对在大肠杆菌上表达的重组融合蛋白中内含肽(Intein)用硫醇(DTT)进行自剪切,促使抗菌肽(MME)碳末端实现酰胺化。【方法】构建用大肠杆菌表达内含肽介导的MME重组质粒,通过表达获得依次由"组氨酸、Sumo标签、MME、内含肽"构成的融合蛋白,用镍柱及透析进行纯化,在MESNa和NH4HCO3存在下,用DTT对内含肽进行自剪切,促使MME碳末端酰胺化,肠激酶切割、纯化,得到碳末端酰胺化的MME。质谱和二级
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